SK-N-BE(2)-C(人神经母细胞瘤细胞)(STR鉴定正确)
细胞名称
SK-N-BE(2)-C(人神经母细胞瘤细胞)(STR鉴定正确)
细胞别称
SK-N-BE(2)C; SK-N-BE-2c; SK-N-BE2(c); SK-N-BE(2C); SK-N-BE(2c); SK-N-BE2C; SK_N_BE2C; SKNBE2C; SKNBE(2c); BE(2)-C; BE(2)C; Be(2)C; BE2-C; BE2_C; Be2-C; BE2C; Be2C
细胞货号
SNL-190
来源
神经母细胞瘤；骨髓转移；男性；2岁2个月
细胞形态
神经母细胞样
细胞类型
肿瘤细胞
生长特性
贴壁细胞
收录
ATCC
生物安全等级
1
致瘤性
Yes, an inoculum of 1×10^7 cells produced tumors in cortisonized hamster cheek pouches with 18% frequency.
培养条件
DMEM+10% FBS+1% P/S
培养环境
空气，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5%
细胞简介
SK-N-BE(2)-C细胞是SK-N-BE(2)的克隆亚系，于1972年从一位多次化疗及放疗的2岁2个月扩散性神经母细胞瘤患男性儿骨髓穿刺物中建立的。据报道，SK-N-BE(2)-C细胞在神经元酶表达方面具有多潜能，并显示出将酪氨酸转化为多巴胺较高的能力。SK-N-BE(2)-C细胞生长为扁平的神经母细胞群，偶尔有细小的细胞突起（神经突），倾向于聚集生长，与母系不同的是SK-N-BE(2)-C细胞通常不会分离和浮动。通过短串联重复序列（STR）-PCR分析无法在该细胞系中检测到Y染色体，是由于癌细胞系的遗传不稳定性增加，Y染色体可能被重新排列或丢失，导致缺乏检测，这是很常见的现象。SK-N-BE(2)-C细胞可以用于3D细胞培养、免疫学研究和神经科学研究。
换液周期
2-3天
培养基体积
T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例
1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法
1.尽量吸干净T25瓶原培养基；
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；
4.将培养瓶放入37度培养箱消化；
5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；
6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项
不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
冻存液配方
92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格
200-300万/ml，1ml每管
冻存方法
1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案
