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| 细胞名称 |
B82(小鼠肿瘤细胞系) |
| 细胞别称 |
B82 (Hamprecht); B-82; GM00347; GM-347; GM0347; GM347; GM00347A |
| 细胞货号 |
SNL-266 |
| 来源 |
皮下结缔组织；雄性；C3H/An；100日龄 |
| 细胞形态 |
成纤维细胞样 |
| 细胞类型 |
肿瘤细胞 |
| 生长特性 |
贴壁细胞 |
| 收录 |
ECACC |
| 生物安全等级 |
1 |
| 致瘤性 |
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| 培养条件 |
DMEM+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 |
空气，95% ； 二氧化碳 (CO2)，5% |
| 细胞简介 |
B82细胞是L-929细胞系通过在BUdR中逐渐筛选所获得的衍生株。B82细胞具有70-80%的克隆形成能力，可用于染色体分析和遗传杂交研究。 |
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| 换液周期 |
2-3天 |
| 培养基体积 |
T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 |
1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 |
1.尽量吸干净T25瓶原培养基；
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS；
3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层；
4.将培养瓶放入37度培养箱消化；
5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化；
6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清；
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里；
8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 |
不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
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| 冻存液配方 |
92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 |
200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 |
1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞；
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管；
3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 |
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
