TE-1细胞:人食管癌细胞详细介绍及细胞培养注意事项

TE-1细胞:人食管癌细胞详细介绍及细胞培养注意事项
TE-1细胞作为一种重要的食管鳞状细胞癌细胞模型,选购时应关注供应商资质、细胞质量保证及技术服务支持。细胞培养涉及复苏、培养、传代等多个精细步骤,须严格遵循无菌操作规程,并对细胞生长状况保持持续监控。针对培养过程中可能出现的问题,采取相应措施解决。通过形态学、生长特性和遗传稳定性验证等方式判断细胞品质。TE-1细胞在肿瘤生物学、药物筛选和基因功能研究等方面发挥了关键作用。

TE-1细胞概述

TE-1细胞是一种源自人类食管鳞状细胞癌的人源细胞系,常用于癌症生物学、药物筛选、基因功能及肿瘤发生发展机制的研究。这类细胞因其稳定性和易于培养的特性,在科研领域内占据重要地位。


TE-1细胞中英文名称及参数

  • 中文名称:TE-1人食管癌细胞
  • 英文名称:TE-1 Human Esophageal Squamous Cell Carcinoma Cells
  • 参数特点:TE-1细胞呈上皮细胞样形态,具有贴壁生长特性,常规培养条件下可在含10%胎牛血清的RPMI1640培养基中良好生长。细胞数通常以1×10(6)cells/T25培养瓶为单位提供,细胞活力高达95%,适用于多种体外实验。

TE-1细胞价格范围

TE-1细胞的价格会根据供应商、细胞批次、纯度、检测报告(如STR鉴定)、以及提供的技术服务等因素有所不同,大致价格区间可能在数百至数千元人民币不等。具体的实时价格应咨询正规生物制品供应商获得。


如何选择购买TE-1细胞的渠道

  • 供应商资质:挑选具有生物制品生产或代理授权资格的企业,如ATCC、ECACC、DSMZ、JCM等知名细胞库或其授权代理商。
  • 细胞品质保证:要求提供完整的细胞系背景信息、最近的STR鉴定结果、无菌检测证明以及详细的细胞培养操作指南。
  • 技术服务支持:确保供应商能提供细胞培养全程的技术指导及售后支持。

TE-1细胞来源、储存及复苏方法

细胞来源:TE-1细胞源自一名男性食管鳞状细胞癌患者的组织样本,经过体外培养建立而成。

细胞储存:细胞长期储存通常采用液氮冷冻法,将细胞混入含血清和冷冻保护剂(如DMSO)的冻存液中,然后放置于液氮罐内。

细胞复苏过程

  1. 快速将冻存管从液氮中取出,立即浸入37°C水浴中解冻。
  2. 待冻存液完全融化后,将细胞转移至无菌离心管中。
  3. 使用预热的完全培养基清洗细胞两次,每次离心后弃去上清。
  4. 用适量的新鲜完全培养基重悬细胞,然后将其转移到预先准备好的培养瓶中,放入37°C、5% CO2的培养箱中恢复培养。

TE-1细胞培养所需仪器设备

  • 二氧化碳培养箱:保持恒温、恒湿和适宜的二氧化碳浓度(通常是37°C、5% CO2)。
  • 倒置显微镜:用于观察细胞生长状态和形态变化。
  • 离心机:进行细胞收集、洗涤和重悬的操作。
  • 液氮罐和冻存装置:用于细胞的冷冻保存。
  • 超净工作台:确保细胞操作在无菌环境中进行。
  • 细胞培养相关耗材:包括培养瓶、培养皿、离心管、移液器等。

TE-1细胞培养步骤详述

  1. 细胞复苏与接种:按照上述复苏流程将细胞接种到预包被有合适饲养层的培养瓶中,初始接种密度视细胞种类和实验需求而定。
  2. 细胞适应期培养:将接种了细胞的培养瓶放入37°C、5% CO2培养箱中,细胞需要一定时间适应新环境并开始贴壁生长。
  3. 培养基更换:根据细胞生长情况定期更换新鲜培养基,一般初次更换在复苏后24-48小时,后续每隔2-3天更换一次。
  4. 细胞传代:当细胞达到融合度80%-90%时,需用胰蛋白酶或 EDTA 进行消化,之后离心收集细胞,用新鲜培养基重悬并调整适当的接种密度进行传代培养。

TE-1细胞培养注意事项

  • 无菌操作:全程严格执行无菌操作,避免微生物污染。
  • 环境控制:确保培养箱的温度、湿度和气体环境稳定。
  • 细胞生长监测:每日观察细胞生长状态,及时记录细胞数量、形态变化和分裂速度。

TE-1细胞培养常见问题及解决方法

问题1:细胞生长不良或死亡率高

  • 可能原因:培养基失效、细胞老化、操作不当或污染。
  • 解决办法:更换新鲜培养基,检查细胞传代时间和操作手法,对培养环境进行全面清洁,并排查是否存在微生物污染。

问题2:细胞形态异常或丧失贴壁特性

  • 可能原因:消化过度、培养基成分错误或细胞状态恶化。
  • 解决办法:优化消化步骤,核实培养基配方正确性,必要时重新购置优质细胞株。

如何鉴别TE-1细胞品质

  • 形态学鉴定:通过显微镜下观察细胞形态特征是否与TE-1细胞相符。
  • 生长曲线分析:绘制细胞生长曲线以确定细胞增殖速率和活性是否正常。
  • 遗传稳定性验证:通过短串联重复序列(STR)分析或其他分子生物学手段确认细胞株的身份。

TE-1细胞应用领域

  • 肿瘤学研究:探讨食管鳞状细胞癌的发生机制、侵袭转移能力以及靶向治疗效果。
  • 药物筛选与药效评价:利用TE-1细胞作为体外模型筛选抗癌药物,评估化合物对食管癌细胞的抑制作用和毒性反应。
  • 基因功能研究:通过转染、CRISPR/Cas9编辑等技术研究与食管癌相关的基因功能及其在疾病进程中的作用。

全文总结

TE-1细胞作为一种重要的食管鳞状细胞癌细胞模型,选购时应关注供应商资质、细胞质量保证及技术服务支持。细胞培养涉及复苏、培养、传代等多个精细步骤,须严格遵循无菌操作规程,并对细胞生长状况保持持续监控。针对培养过程中可能出现的问题,采取相应措施解决。通过形态学、生长特性和遗传稳定性验证等方式判断细胞品质。TE-1细胞在肿瘤生物学、药物筛选和基因功能研究等方面发挥了关键作用。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:30:17
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