RKO-E6细胞:人结肠癌转基因细胞详细介绍及细胞培养注意事项

RKO-E6细胞:人结肠癌转基因细胞详细介绍及细胞培养注意事项
RKO-E6细胞作为携带HPV E6基因的人结肠癌细胞系,是研究HPV相关结肠癌及p53功能丧失效应的重要工具。在购买和培养过程中,科研人员需关注细胞来源、质量保证以及供应商的服务水平。正确的细胞培养涉及严格无菌操作、适宜的环境控制和细致的细胞状态监测。在面对培养过程中出现的问题时,应及时调整培养条件或寻求技术支持。通过RKO-E6细胞,研究人员可在癌症研究、药物筛选和分子生物学等多个领域取得实质性的进展。

RKO-E6细胞概述

RKO-E6细胞是一种源自人结肠癌组织的人源细胞系,该细胞系具有稳定整合的人乳头状瘤病毒(HPV)E6基因,常用于研究HPV感染与结肠癌发生发展的关系,以及探讨p53缺失对细胞增殖、凋亡和药物敏感性的影响。


RKO-E6细胞说明书与参数

  • 细胞名称:RKO-E6细胞
  • 组织来源:人结肠癌组织
  • 细胞特性:贴壁生长,含有HPV E6癌基因,具有结肠癌细胞的基本特性
  • 培养条件:最常用的培养基为MEM或DMEM/F12,并添加10%胎牛血清,在37°C、5% CO2的恒温恒湿环境中培养

RKO-E6细胞市场价格

RKO-E6细胞在中国市场的售价通常在人民币1000元至3000元之间,具体价格会受到供应商、细胞质量(包括STR鉴定、无菌性、细胞活力等指标)、细胞数量等因素影响,建议直接咨询供应商获取最新价格信息。


如何选择公司购买RKO-E6细胞

  • 公司资质:选择拥有合法经营许可、良好口碑和专业服务能力的生物制品公司或细胞库。
  • 细胞质量保证:确保所购细胞已经过STR鉴定,无菌检测合格,并提供完整的细胞参数、代数和来源信息。
  • 技术支持:优先选择提供详尽细胞培养指南、技术支持和售后保障的供应商。

RKO-E6细胞来源、特性与类型

  • 来源:RKO-E6细胞是由原RKO细胞(人结肠癌细胞系)通过转染HPV E6基因构建而成。
  • 特性:具有人结肠癌细胞的生物学特性,并因整合了HPV E6基因,使p53功能丧失,有助于研究p53在肿瘤发生和发展中的作用。
  • 类型:属于人结肠癌细胞株,特别适用于探讨HPV相关结肠癌的分子机制和药物筛选研究。

培养所需仪器设备

  • 细胞培养箱:维持37°C、5% CO2的恒温恒湿环境。
  • 离心机:用于细胞收集、洗涤和浓缩。
  • 倒置显微镜:观察细胞形态、生长状态及细胞接种。
  • 细胞培养瓶、皿、管:用于细胞培养和传代操作。
  • 液氮罐和冻存管:用于细胞的长期储存和复苏。
  • 水浴锅或加热板:用于细胞冻存液的解冻。

RKO-E6细胞储存及复苏方法

  • 储存:将RKO-E6细胞与冻存保护液混合后,保存在液氮罐中长期储存。
  • 复苏流程
    1. 解冻:将冻存管快速放入37°C水浴中融化。
    2. 转移细胞:将细胞悬液转移到预冷的离心管中。
    3. 离心与清洗:离心后弃去冻存液,用预热的完全培养基清洗细胞。
    4. 重悬与接种:将细胞用新鲜的完全培养基重悬,然后接种到预处理好的培养容器中。

RKO-E6细胞培养步骤(详细版)

  • 培养基准备:根据供应商推荐,配置含有10%胎牛血清的MEM或DMEM/F12培养基。
  • 细胞接种:将复苏或传代后的细胞均匀分布到培养瓶底部。
  • 细胞培养:将接种细胞的培养瓶放入37°C、5% CO2的培养箱中培养,每天观察细胞生长状态。
  • 换液与传代:每2-3天更换一次新鲜培养基,当细胞生长至适当密度时,使用胰酶或EDTA-胰酶混合液消化细胞,然后进行传代。

RKO-E6细胞培养注意事项

  • 无菌操作:所有涉及细胞的操作必须在超净工作台上进行,确保无菌环境。
  • 环境控制:保持恒定的温度、湿度和CO2浓度。
  • 细胞状态监测:定期通过显微镜观察细胞形态、生长速度及有无污染迹象。

培养常见问题与解决方案

  • 生长缓慢或停滞:检查培养基的新鲜度、血清批次,必要时更换新鲜培养基或调整细胞接种密度。
  • 细胞形态异常:确保培养条件稳定,排除物理、化学因素及微生物污染的影响。

如何鉴定RKO-E6细胞品质

  • 形态学鉴定:通过显微镜观察细胞形态是否符合RKO-E6细胞的标准特征。
  • 细胞活力检测:使用台盼蓝拒染法或其他细胞活力检测方法评估细胞活力。
  • STR分析:进行DNA指纹分析,验证细胞株的身份和纯度,确认RKO-E6细胞的遗传稳定性。

RKO-E6细胞应用领域

  • 癌症研究:研究HPV感染与结肠癌发生发展的关联,以及探讨p53功能丧失对细胞增殖和凋亡的影响。
  • 药物筛选与药效评价:作为体外模型筛选针对结肠癌及HPV相关肿瘤的候选药物,并评估其药效和安全性。
  • 分子生物学研究:利用RKO-E6细胞探讨不同基因在肿瘤发生过程中的作用以及可能的干预策略。

全文总结

RKO-E6细胞作为携带HPV E6基因的人结肠癌细胞系,是研究HPV相关结肠癌及p53功能丧失效应的重要工具。在购买和培养过程中,科研人员需关注细胞来源、质量保证以及供应商的服务水平。正确的细胞培养涉及严格无菌操作、适宜的环境控制和细致的细胞状态监测。在面对培养过程中出现的问题时,应及时调整培养条件或寻求技术支持。通过RKO-E6细胞,研究人员可在癌症研究、药物筛选和分子生物学等多个领域取得实质性的进展。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:24:52
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