RBL-2H3细胞:大鼠嗜碱性细胞白血病细胞详细介绍及细胞培养注意事项

RBL-2H3细胞:大鼠嗜碱性细胞白血病细胞详细介绍及细胞培养注意事项
RBL-2H3细胞是一种重要的研究工具,尤其在过敏反应和信号转导方面具有不可替代的作用。购买时需关注细胞来源和质量,培养过程中须严格执行无菌操作,妥善处理细胞储存与复苏、培养和传代等各个环节。面对常见问题,应有相应的解决方案,并通过优化培养条件提高实验效率和准确性。此外,借助RBL-2H3细胞在广泛的生物学和医药研究领域发挥着积极作用。

1. RBL-2H3细胞参数与基本信息

细胞名称:大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞(RBL-2H3细胞)

细胞类型:大鼠肥大细胞模型细胞,也常被称为“RBL细胞”

来源:RBL-2H3细胞来源于Sprague-Dawley大鼠的腹腔肥大细胞瘤。

2. RBL-2H3细胞市场价格区间

  • 价格参考:RBL-2H3细胞的市场价格会因供应商、细胞数量、配套试剂和服务等因素的变化而有所差异,一般而言,细胞价格区间可能在几百到几千元人民币之间。具体价格需直接向供应商咨询以获取实时报价。

3. 如何选择公司购买RBL-2H3细胞

  • 选择考量
    1. 供应商资质:优选ATCC、Sciencell、中国科学院细胞库等国内外知名细胞供应商,确保细胞来源明确且具有完善的质量管理体系。
    2. 细胞质量:检查细胞是否提供详细的鉴定报告、无菌检测和STR分型分析结果,确保细胞系的真实性与纯净度。
    3. 售后服务:选择提供详细细胞培养指南、技术支持和售后服务的公司,以便在细胞培养过程中出现问题时得到及时协助。

4. RBL-2H3细胞来源与特性

  • 细胞来源:RBL-2H3细胞来源于大鼠腹腔自发形成的肥大细胞瘤,其生物学特性与正常的嗜碱性粒细胞相似,特别适用于研究肥大细胞的生物学行为和功能。
  • 细胞特性:RBL-2H3细胞具有高表达FcεRI受体的特点,对外源性IgE-FcεRI复合物有高度敏感性,可通过IgE介导的途径诱发细胞脱颗粒反应,因此在过敏反应、信号转导等领域具有广泛应用价值。

5. RBL-2H3细胞储存与复苏方法

  • 储存
    • 细胞采用含冷冻保护剂(如DMSO)的冻存液在液氮或-80°C冰箱中长期储存。
  • 复苏
    1. 融化:从液氮或-80°C冰箱中取出冻存管,迅速放入37°C水浴中,直到冻存液完全融化。
    2. 离心:将细胞悬液转移至离心管,1000rpm离心5分钟左右。
    3. 洗涤重悬:弃去上清液,用预先加热至室温的完全培养基重悬细胞。
    4. 接种:将细胞悬液均匀接种至已经预处理好的培养容器中。

6. RBL-2H3细胞培养步骤(详细)

  • 细胞接种
    1. 准备容器:将培养瓶或培养皿用PBS清洗干净,然后加入适量预热的完全培养基。
    2. 接种细胞:将复苏好的细胞悬液以适当密度(比如1-5×10^5cells/ml)接种到培养容器中。
    3. 培养:将接种好的容器放入37°C、5% CO2的恒温恒湿培养箱中培养。
  • 日常管理
    1. 观察:每日观察细胞生长情况,记录细胞形态和生长状态。
    2. 换液:每2-3天更换一次新鲜的完全培养基,保持细胞的良好生长环境。
  • 细胞传代
    1. 消化:当细胞达80%-90%汇合度时,使用胰酶-EDTA消化细胞。
    2. 终止消化:将适量预热的完全培养基加入终止消化反应。
    3. 离心:将细胞悬液离心收集,并用新鲜培养基重悬。
    4. 重新接种:将细胞按照一定比例接种到新的培养容器中。

7. RBL-2H3细胞培养注意事项

  • 无菌操作:全程操作应在超净工作台上进行,严格遵守无菌操作规程。
  • 环境控制:确保培养箱的温度、湿度、CO2浓度保持稳定。
  • 定期检查:注意细胞形态、生长速度和活力,定期进行细胞计数和活力检测。

8. RBL-2H3细胞培养常见问题及解决方法

  • 生长迟缓:检查培养基是否过期、血清质量是否合格,或调整血清浓度、换液频率等。
  • 细胞污染:若发现微生物污染,应立即停止使用并进行消毒处理,重新购买细胞。

9. 鉴别RBL-2H3细胞品质

  • 形态观察:通过显微镜观察细胞形态是否正常,是否有异形、碎片或污染物。
  • 生长曲线:通过连续几天观察细胞生长曲线,评估细胞增殖速度和稳定性。
  • 功能验证:利用特定实验(如IgE介导的脱颗粒实验)验证细胞的基本功能。

10. RBL-2H3细胞优化方法

  • 培养基优化:尝试不同配方的培养基,调整血清含量、添加生长因子等。
  • 传代策略:合理控制细胞传代次数,避免细胞过度衰老或突变。

11. RBL-2H3细胞应用领域

  • 过敏与免疫学研究:利用RBL-2H3细胞研究IgE介导的过敏反应机制。
  • 信号转导研究:通过RBL-2H3细胞揭示细胞内信号通路调控机制。
  • 药物筛选与毒性评估:作为体外模型,用于筛选抗过敏药物或评估化合物对肥大细胞的影响。

12. 总结

RBL-2H3细胞是一种重要的研究工具,尤其在过敏反应和信号转导方面具有不可替代的作用。购买时需关注细胞来源和质量,培养过程中须严格执行无菌操作,妥善处理细胞储存与复苏、培养和传代等各个环节。面对常见问题,应有相应的解决方案,并通过优化培养条件提高实验效率和准确性。此外,借助RBL-2H3细胞在广泛的生物学和医药研究领域发挥着积极作用。

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平平
  • 本文由 平平 发表于 2024年2月23日11:46:12
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