NCI-H23细胞_人非小细胞肺癌细胞

NCI-H23细胞_人非小细胞肺癌细胞

NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞)(STR鉴定正确)
细胞名称
NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞)(STR鉴定正确)

细胞别称
NCI.H23; NCI H23; H23; H-23; NCIH23

细胞货号
SNL-220

来源
肺腺癌;男性;51岁

细胞形态
上皮细胞样

细胞类型
肿瘤细胞

生长特性
贴壁细胞

收录
ATCC

生物安全等级
1

致瘤性

培养条件
1640+10% FBS+1% P/S

培养环境
空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%

细胞简介
NCI-H23细胞源于一位51岁患有非小细胞肺癌黑人男性患者的治疗前的肿瘤组织,表达C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erbB、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs。NCI-H23细胞携带K-ras 12突变,p53基因246位密码子突变ATC→ATG,表达PDGF A和B链的异源mRNA,表达TGFα、TGFβ和EGFR,角蛋白5、8和18阳性,波形蛋白阳性,神经丝蛋白阴性,左旋多巴脱氢酶阴性。NCI-H23表现出高度的c-myc DNA扩增(20倍),但未检测到c-myc RNA的扩增。据报道,NCI-H23细胞在软琼脂中形成克隆的效率为9.7%。NCI-H23细胞可以用于3D细胞培养、癌症研究、高通量筛选和毒理学研究。

换液周期
2-3天

培养基体积
T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml

传代比例
1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法
1.尽量吸干净T25瓶原培养基;

2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;

3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;

4.将培养瓶放入37度培养箱消化;

5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;

6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;

7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;

8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;

注意事项
不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

冻存液配方
92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);

冻存规格
200-300万/ml,1ml每管

冻存方法
1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;

2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;

3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

注意事项
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

weinxin
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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:38:44
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