NCI-H2228细胞:人肺腺癌细胞详细介绍及细胞培养注意事项

NCI-H2228细胞:人肺腺癌细胞详细介绍及细胞培养注意事项
NCI-H2228细胞作为一种有价值的肺癌研究模型,其购买、培养、应用和品质控制都需要严谨细致的操作。从选择合规渠道购买,到规范的细胞复苏、培养、传代,再到针对可能出现的问题采取有效解决措施,都是保证实验数据准确性和可靠性的关键环节。此外,通过合理应用这些细胞,可在肺癌研究的多个方向取得突破性进展。

NCI-H2228细胞概述

NCI-H2228细胞是一种来源于人类肺腺癌的永生化细胞系,常用于肺癌发病机制、药物筛选、耐药性研究等多个领域的科学研究。该细胞具有代表性肺癌病理特征,对于探讨肺癌治疗策略及新型抗癌药物研发有着重要意义。


NCI-H2228细胞详细介绍与参数

NCI-H2228细胞属于非小细胞肺癌亚型,具有高转移潜能和特定基因突变特点。其具体参数包括但不限于:

  • 细胞形态:梭形或多角形
  • 增殖速率:较快
  • 生长条件:RPMI 1640完全培养基,含10%胎牛血清,37℃,5% CO2饱和湿度条件下培养
  • 溶解氧需求:常规水平
  • 接种密度推荐:通常为每平方厘米5000-15000个细胞
  • 注意:具体细胞参数需参考供应商提供的详细资料。

NCI-H2228细胞价格范围

购买NCI-H2228细胞的价格因供应商不同、包装规格以及是否包含相关认证服务等因素而有所差异,一般市场价格在几百到上千元人民币不等。建议直接联系有资质的生物制品公司或科研服务机构获取准确报价。


如何选择购买NCH-H2228细胞的渠道

购买NCI-H2228细胞时,应优先选择具有以下特质的渠道:

  • 资质齐全:确保供应商具备合法销售生物材料的资质和国际通行的质量标准认证,如ATCC或ECACC等。
  • 质量保证:要求提供细胞株的STR分型验证报告,证明细胞的身份和纯度。
  • 技术服务:优质的售后服务和技术支持,包括详细的细胞培养指导和细胞活性检测报告。

NCI-H2228细胞来源与储存、复苏方法

细胞来源: NCI-H2228细胞最初由美国国家癌症研究所(NCI)建立,取自一位肺腺癌患者的肿瘤组织样本。

细胞储存

  • 使用含有冻存保护剂(如DMSO)的冻存液将细胞悬液于-80℃液氮罐中长期保存。
  • 冻存管标签需清晰记录细胞名称、编号、冻存日期等相关信息。

细胞复苏

  1. 将冻存管迅速浸入37℃水浴中,轻柔摇动至冰晶完全溶解,但不超过2分钟。
  2. 立即将融解的细胞悬液移入预热的PBS缓冲液中清洗一次,以去除DMSO。
  3. 之后按适当比例稀释后接种到预装有适量完全培养基的培养皿或瓶中。
  4. 放入培养箱内,观察细胞贴壁情况并及时更换新鲜培养基。

NCI-H2228细胞培养步骤详解

步骤一:准备

  • 清洁消毒工作台及相关器具。
  • 配制RPMI 1640培养基,并添加10%胎牛血清形成完全培养基,预热至37℃。

步骤二:细胞接种

  • 取出细胞瓶,吸去旧培养基,加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液消化细胞。
  • 定时观察细胞脱落情况,待大部分细胞变圆后终止消化,加入完全培养基中止消化过程。
  • 轻轻吹打使细胞充分悬浮,计算细胞密度后,按所需接种密度均匀接种到新培养容器中。

步骤三:日常培养

  • 将接种好的细胞置于37℃、5% CO2孵箱中培养。
  • 每天观察细胞生长状况,必要时调整培养基PH值。
  • 按照细胞生长速度定期换液,通常每周换液1-2次。

步骤四:细胞传代

  • 当细胞汇合度达到70%-80%时,按照上述步骤进行细胞消化和接种,实现细胞传代。

NCI-H2228细胞培养注意事项

  • 无菌操作:全程严格遵守无菌原则,防止微生物污染。
  • 监控生长状态:定时监测细胞生长曲线和形态变化,及时发现问题并调整培养条件。
  • 维持稳定的环境:保持恒定的温度、湿度和CO2浓度,避免环境波动影响细胞生长。
  • 慎重处理细胞废弃物:废弃的培养物应视为生物危害废物,按照规定妥善处理。

NCI-H2228细胞培养常见问题及解决方法

问题1:细胞生长停滞

  • 原因:培养基失效、细胞老化或污染。
  • 解决方法:更换新鲜培养基,检查细胞是否衰老,如有污染迹象则丢弃并重新订购细胞。

问题2:细胞形态异常

  • 原因:培养条件不适宜、细胞受到毒害或发生变异。
  • 解决方法:调整培养条件,排查添加的试剂是否有毒性,并进行细胞鉴定确认其身份。

如何鉴别NCI-H2228细胞品质

  • 形态观察:通过倒置显微镜观察细胞形态是否正常,排列是否整齐。
  • 生长曲线分析:测定细胞增殖能力,评估细胞活力。
  • 遗传稳定性检验:通过STR分析验证细胞株的一致性和纯度。

NCI-H2228细胞的应用领域

NCI-H2228细胞广泛应用于:

  • 肺癌发病机制的研究
  • 抗癌药物筛选及药效评价
  • 耐药性机制探索
  • 分子靶向治疗相关的基础研究和临床前试验

全文总结

NCI-H2228细胞作为一种有价值的肺癌研究模型,其购买、培养、应用和品质控制都需要严谨细致的操作。从选择合规渠道购买,到规范的细胞复苏、培养、传代,再到针对可能出现的问题采取有效解决措施,都是保证实验数据准确性和可靠性的关键环节。此外,通过合理应用这些细胞,可在肺癌研究的多个方向取得突破性进展。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:30:40
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