MLO-Y4 [MLOY4]细胞_小鼠骨样细胞

MLO-Y4 [MLOY4]细胞_小鼠骨样细胞

MLO-Y4 [MLOY4](小鼠骨样细胞)

细胞名称 MLO-Y4 [MLOY4](小鼠骨样细胞) 细胞别称 MLOY4; Murine Long bone Osteocyte-Y4 细胞货号 SNL-370 来源 骨;SV40转化;(C57BL/6J x BALB/cJ) F2 Bgla promoter T-Ag transgenic;14日龄 细胞形态 骨样细胞 细胞类型 转化细胞系 生长特性 贴壁细胞 收录 中山大学附五医 生物安全等级 2 致瘤性 培养条件 DMEM+10% FBS+1% P/S 培养环境 空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5% 细胞简介 MLO-Y4细胞是从14日龄(C57BL/6J x BALB/cJ)F2 Bgla启动子T-Ag转基因小鼠中分离的。MLO-Y4细胞的性质与原代骨细胞非常相似,与原代骨细胞相同而与原代成骨细胞不同的是,该细胞系产生大量骨钙素,但碱性磷酸酶含量较低,且产生非常少量的I型胶原mRNA。MLO-Y4细胞产生广泛、复杂的树突过程,并且T抗原、骨桥蛋白、神经抗原CD44和缝隙连接蛋白连接蛋白43呈阳性。。MLO-Y4细胞缺乏可检测到的成骨细胞特异性因子2的mRNA,这似乎是成骨细胞的阳性标志,也可能是骨细胞的阴性标志。MLO-Y4细胞对于研究机械应力对骨细胞功能的影响以及确定骨细胞与其他骨细胞(如成骨细胞和破骨细胞)相互作用的方式应该是有用的。 换液周期 2-3天 培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml 传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) 传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; 注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); 冻存规格 200-300万/ml,1ml每管 冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日14:08:36
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