MCF 10A细胞_人正常乳腺上皮细胞

MCF 10A细胞_人正常乳腺上皮细胞

MCF 10A(人正常乳腺上皮细胞)(STR鉴定正确)
细胞名称
MCF 10A(人正常乳腺上皮细胞)(STR鉴定正确)

细胞别称
MCF 10A; MCF.10A; MCF10A; MCF10a; MCF-10 Attached; Michigan Cancer Foundation-10A

细胞货号
SNL-225

来源
乳腺;上皮细胞;自发永生;女性;36岁

细胞形态
上皮细胞样

细胞类型
正常细胞

生长特性
贴壁细胞

收录
ATCC

生物安全等级
1

致瘤性
No, in immunosuppressed mice;Yes, in semisolid medium

培养条件
DMEM+10% FBS+20ng/mL EGF+0.5μg/mL Hydrocortisone+10μg/mL Insulin+1% NEAA+1% P/S

培养环境
空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%

细胞简介
MCF 10A细胞于1984年从患有纤维囊性乳房的36岁白人女性的乳腺中分离出来,来源于群体中的粘附细胞,是一种非致瘤性上皮细胞系。MCF 10A细胞通过电子显微镜观察,显示出管腔导管细胞的特征,而不是肌上皮细胞的特征,同时培养基中的钙含量对细胞的形态有很大影响。MCF 10A细胞上皮唾液粘液、细胞角蛋白和乳脂球抗原呈阳性,还表达通过与MFA乳腺和MC-5单克隆抗体的阳性反应检测到的乳腺特异性抗原。MCF 10A细胞在胶原蛋白中表现出三维生长,并在融合培养物中形成圆顶。到目前为止,细胞还没有表现出终末分化或衰老的迹象。MCF 10A细胞对胰岛素、糖皮质激素、霍乱肠毒素和表皮生长因子(EGF)有反应。MCF 10A细胞可以用于3D细胞培养,也是一种合适的转染宿主。

换液周期
2-3天

培养基体积
T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml

传代比例
1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法
1.尽量吸干净T25瓶原培养基;

2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;

3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;

4.将培养瓶放入37度培养箱消化;

5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;

6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;

7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;

8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;

注意事项
不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

冻存液配方
92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);

冻存规格
200-300万/ml,1ml每管

冻存方法
1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;

2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;

3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

注意事项
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

weinxin
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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:40:32
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