MC3T3-E1细胞_小鼠胚胎成骨细胞

MC3T3-E1细胞_小鼠胚胎成骨细胞

MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞)

细胞名称 MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞) 细胞别称 MC3T3-E1 细胞货号 SNL-518 来源 胚胎/新生鼠;颅骨;C57BL/6;小于1日龄 细胞形态 成纤维细胞样 细胞类型 正常细胞 生长特性 贴壁细胞 收录 CCTCC 生物安全等级 1 致瘤性 培养条件 EMEM(MEM+NEAA)+10% FBS+1% P/S 培养环境 空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5% 细胞简介 MC3T3-E1细胞从C57BL/6小鼠颅骨中建立,并基于静息状态下的选择高碱性磷酸酶(ALP)活性。MC3T3-E1细胞具有分化成成骨细胞和骨细胞的能力,并已被证明可以在体外形成钙化的骨组织,矿物沉积已被鉴定为羟基磷灰石。MC3T3-E1细胞的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA和蛋白的表达已被证明可以通过TGF-β和bFGF的处理来调节。据报道,前列腺素F2a可以通过上调MC3T3-E1细胞胰岛素样生长因子I受体来刺激DNA合成和增殖。MC3T3-E1细胞分泌胶原并在RNA中表达小鼠白血病抑制因子(mLIF)。 换液周期 2-3天 培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml 传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) 传代方法 1.尽量吸干净T25瓶原培养基;
2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4.将培养瓶放入37度培养箱消化;
5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;
6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; 注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); 冻存规格 200-300万/ml,1ml每管 冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日14:08:03
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