KYSE-30细胞:人食管鳞癌细胞详细介绍及细胞培养注意事项

KYSE-30细胞:人食管鳞癌细胞详细介绍及细胞培养注意事项
KYSE-30细胞作为一个人类食管鳞状细胞癌细胞系,在科研实验中有多种用途,尤其在癌症研究中发挥着核心作用。购买此类细胞时需注意供应商资质、细胞质量及相关的技术支持。正确的细胞复苏、培养、传代等步骤至关重要,期间要密切关注细胞的状态和环境因素。针对可能出现的问题,要及时采取措施进行纠正,并通过形态观察、生长曲线分析以及STR鉴定等方式确保细胞的品质。KYSE-30细胞在肿瘤研究、新药研发以及基础医学研究中有着广阔的应用前景。

KYSE-30细胞概述

KYSE-30细胞是一种源自人食管鳞状细胞癌的人源细胞系,广泛应用于癌症研究、药物筛选、病理机制探索以及药物治疗效果评价等方面。该细胞系因其稳定的生物学特性和肿瘤相关表型,成为食管鳞癌体外研究的重要模型。


KYSE-30细胞中英文名称及参数

  • 中文名称:KYSE-30人食管鳞癌细胞
  • 英文名称:KYSE-30 Human Esophageal Squamous Cell Carcinoma Cell Line
  • 参数特点:KYSE-30细胞一般以T25培养瓶的形式提供,细胞数量规格大约为1×10(6)cells/T25瓶,也可以按毫升计数提供冻存细胞悬液。该细胞系经过STR鉴定,确保其身份的准确性和遗传稳定性。

KYSE-30细胞价格范围

KYSE-30细胞的具体价格会因市场供需、供应商政策、配套服务(如STR鉴定、无菌检测等)而有所不同,通常情况下,此类细胞系的价格区间可能在几千元人民币之间,实际价格需向专业生物试剂供应商咨询。


如何选择购买KYSE-30细胞的渠道

  • 供应商资质:优先选择具备正规资质、具有良好业界口碑的生物试剂公司或细胞库购买,确保细胞来源合法且品质可靠。
  • 细胞认证资料:购买前要求供应商提供详尽的细胞鉴定报告、无菌检测证明、细胞来源信息以及细胞生长特性等数据。
  • 售后服务和技术支持:确保供应商能够提供全程的技术指导,包括细胞复苏、培养方法以及在实验过程中可能遇到问题的解决方案。

KYSE-30细胞来源、储存及复苏方法

细胞来源:KYSE-30细胞起源于一位64岁患有高分化中段食管鳞状细胞癌男性的肿瘤组织,经体外培养建立而成。

细胞储存:长期储存时,细胞置于含冷冻保护剂的冻存管中,然后在液氮罐中冷冻保存。

细胞复苏流程

  1. 将冻存管从液氮中取出,迅速转移至37°C水浴中进行解冻,直至内容物完全溶解。
  2. 解冻后的细胞悬液转移到无菌离心管中,加入预先加热至室温的完全培养基中稀释。
  3. 使用离心机以适当转速离心细胞,弃去上清液,然后用新鲜预热的完全培养基轻轻重悬细胞。
  4. 将重悬后的细胞接种到预先用培养基湿润的培养瓶中,放置于37°C、5% CO2条件下培养箱中继续培养。

KYSE-30细胞培养所需仪器设备

  • 二氧化碳培养箱:维持恒定的温度(37°C)、湿度及二氧化碳浓度(5%)。
  • 倒置显微镜:用于日常观察细胞形态和生长情况。
  • 离心机:用于细胞收集、洗涤和重悬操作。
  • 液氮罐和冻存装置:用于细胞的冷冻储存。
  • 超净工作台:提供洁净无菌的操作环境。
  • 细胞培养瓶、培养皿、离心管等:必备的细胞培养耗材。

KYSE-30细胞培养步骤详解

  1. 细胞复苏与接种:按照上述复苏流程操作,确保细胞安全、有效复苏后接种至预涂有适宜饲养层或无饲养层的培养瓶中。
  2. 细胞适应性培养:将接种细胞的培养瓶放入37°C、5% CO2的培养箱中,待细胞贴壁并开始生长。
  3. 培养基更换:复苏后48小时内更换第一次培养基,之后根据细胞生长密度和代谢情况定期更换新鲜培养基。
  4. 细胞传代:当细胞融合率达到70%-80%时,利用胰蛋白酶或EDTA进行消化,收集细胞,再按照一定比例稀释后传代至新的培养容器中。

KYSE-30细胞培养注意事项

  • 无菌操作:所有细胞操作均需在超净工作台上完成,遵循严格的无菌操作规范。
  • 环境控制:保持培养箱内部温度、湿度和CO2浓度的稳定。
  • 细胞监测:定时观察细胞形态、生长状态和有无污染迹象,必要时做相应的调整。

KYSE-30细胞培养常见问题及解决方法

问题1:细胞生长不良或死亡率高

  • 可能原因:复苏不当、培养条件不合适或培养基失效。
  • 解决办法:核实复苏流程是否正确,检查培养箱设置和培养基的有效期,并考虑更换新鲜培养基。

问题2:细胞形态异常或脱落

  • 可能原因:消化过度、渗透压波动或细胞过密导致竞争压力增大。
  • 解决办法:优化消化程序,确保溶液pH值和渗透压稳定,及时进行细胞传代。

如何鉴别KYSE-30细胞品质

  • 形态观察:正常的KYSE-30细胞应呈现出上皮细胞样的形态特征,排列整齐且无明显异形细胞。
  • 生长曲线测定:通过连续测量细胞的数量,构建生长曲线,评估细胞的增殖活性和代际稳定性。
  • STR鉴定复核:如果有必要,可再次进行STR分析,验证细胞系的身份和遗传稳定性。

KYSE-30细胞应用领域

  • 肿瘤生物学研究:探究食管鳞状细胞癌的发生机制、侵袭转移能力及耐药机制。
  • 药物筛选与药效评价:作为体外模型筛选抗食管癌候选药物,评估药物作用机制和毒性反应。
  • 基础医学研究:用于研究特定基因的功能、信号传导途径以及癌细胞与周围微环境相互作用的研究。

全文总结

KYSE-30细胞作为一个人类食管鳞状细胞癌细胞系,在科研实验中有多种用途,尤其在癌症研究中发挥着核心作用。购买此类细胞时需注意供应商资质、细胞质量及相关的技术支持。正确的细胞复苏、培养、传代等步骤至关重要,期间要密切关注细胞的状态和环境因素。针对可能出现的问题,要及时采取措施进行纠正,并通过形态观察、生长曲线分析以及STR鉴定等方式确保细胞的品质。KYSE-30细胞在肿瘤研究、新药研发以及基础医学研究中有着广阔的应用前景。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:30:23
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