KU812细胞:人外周血嗜碱性白血病细胞详细介绍及细胞培养注意事项

KU812细胞:人外周血嗜碱性白血病细胞详细介绍及细胞培养注意事项
KU812细胞作为研究白血病和嗜碱性粒细胞功能的重要模型,其选购、培养和使用对于基础医学研究和药物研发具有关键意义。在实际操作中,科研人员需要重视细胞的获取渠道、存储、复苏和培养细节,熟练掌握培养技巧并能及时解决可能出现的问题。同时,通过科学的方法验证细胞的品质和功能活性,确保实验数据的准确性和可靠性。

1. KU812细胞概述

KU812细胞是一种人源外周血嗜碱性白血病细胞株,源于一名患有慢性髓性白血病(CML)患者的暴发期外周血样本。这种细胞系常用于血液学疾病的研究,特别是与嗜碱性粒细胞功能、白血病细胞生物学以及药物筛选相关的实验。


2. KU812细胞说明书与参数

  • 细胞名称:KU812细胞
  • 细胞类型:嗜碱性白血病细胞
  • 组织来源:人类外周血
  • 细胞特性:携带Ph1(费城)染色体,具有嗜碱性细胞标志如Fc受体和碱性颗粒,不表达淋巴细胞标记

3. KU812细胞市场价格区间

  • 参考价格:KU812细胞的价格在市场上波动较大,大致在人民币1000元至3000元之间,具体取决于供应商、细胞数量、细胞活力、是否带有STR鉴定证明以及是否包含相应的技术服务支持等。

4. 如何选择公司购买KU812细胞

  1. 供应商认证:优先选择经过认证且有良好口碑的生物制品公司或细胞库。
  2. 细胞鉴定与质量:要求提供细胞的鉴定报告,包括STR分型、无菌检测(如支原体检测)以及细胞活力数据。
  3. 技术支持:考察供应商是否提供详尽的细胞培养手册和技术咨询服务。
  4. 运输方式:确保细胞在运输过程中的保存条件符合标准,例如采用干冰运输保证细胞活性。

5. KU812细胞类型说明

  • 细胞分类:属于血液系统肿瘤细胞株
  • 细胞特性细分:具备嗜碱性粒细胞特征,可用于研究白血病的发生机制、细胞信号转导通路及药物敏感性。

6. KU812细胞来源与特性

  • 来源:从一名慢性髓性白血病患者的外周血中建立
  • 细胞特性:具有嗜碱性粒细胞的功能特点,能够在体外稳定增殖,对研究白血病病理生理过程和药物筛选具有重要意义

7. KU812细胞储存及复苏方法

  • 储存:通常以液氮冷冻的方式储存,使用含有保护剂的冻存液将其冻存于-196℃液氮罐中。
  • 复苏流程
    1. 快速取出冻存管放入37℃水浴中,待细胞完全溶解。
    2. 将细胞悬液转移至离心管中,加入适量预热的完全培养基稀释。
    3. 低速离心后弃去冻存液,用完全培养基重新悬浮细胞。
    4. 将细胞移植到预涂有合适涂层(如多聚赖氨酸)的培养瓶中,放置于适宜条件下培养。

8. KU812细胞培养步骤详解

  1. 培养基准备:使用RPMI1640(不含HEPES)或其他指定培养基,添加适量胎牛血清和其他必需添加剂。
  2. 细胞接种:复苏后的细胞或经传代的细胞,按照适宜浓度接种到无菌处理过的培养瓶中。
  3. 细胞培养:将接种好的细胞置于37℃、5% CO2的恒温恒湿培养箱中培养。
  4. 换液与观察:每天观察细胞生长情况,每2-3天更换一次新鲜培养基。
  5. 细胞传代:当细胞达到融合度约80%-90%时,使用适当的消化液(如胰酶-EDTA)消化细胞,并按照一定比例进行传代。

9. KU812细胞培养注意事项

  • 无菌操作:全程在超净工作台上进行,严格遵守无菌操作规程。
  • 培养条件:保持恒定的温度、湿度及二氧化碳浓度,避免影响细胞生长。
  • pH值监控:关注培养液pH值的变化,确保缓冲系统正常。
  • 瓶盖松紧:避免培养瓶盖过紧导致气体交换不良,造成细胞受损。

10. KU812细胞培养常见问题及解决方法

  • 培养液pH值快速下降:可能是CO2张力不准确、瓶盖过紧等原因,需调整培养条件或适当放松瓶盖。
  • 细胞生长不佳:检查培养基质量、血清批次、细胞接种密度及细胞活力,必要时更换新鲜培养条件或细胞。

11. 鉴别KU812细胞品质

  • 形态观察:通过显微镜检查细胞形态是否正常,核浆比例是否恰当。
  • 生长曲线测定:记录细胞生长速率和倍增时间,反映细胞活力和稳定性。
  • STR鉴定:利用STR分型技术验证细胞株的真实性。
  • 功能测试:针对嗜碱性粒细胞特异性功能,如组胺释放试验等,检验细胞功能是否完好。

12. KU812细胞应用领域

  • 白血病研究:探索白血病发病机理,尤其是与嗜碱性粒细胞相关的CML研究。
  • 药物筛选:用于新型抗白血病药物的研发和现有药物的效果评价。
  • 免疫学研究:研究嗜碱性粒细胞的免疫反应及其在炎症反应中的作用。
  • 信号通路研究:通过KU812细胞揭示细胞增殖、分化和凋亡相关的信号传导途径。

总结

KU812细胞作为研究白血病和嗜碱性粒细胞功能的重要模型,其选购、培养和使用对于基础医学研究和药物研发具有关键意义。在实际操作中,科研人员需要重视细胞的获取渠道、存储、复苏和培养细节,熟练掌握培养技巧并能及时解决可能出现的问题。同时,通过科学的方法验证细胞的品质和功能活性,确保实验数据的准确性和可靠性。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:27:07
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