J774A.1细胞:小鼠单核巨噬细胞详细介绍及细胞培养注意事项

J774A.1细胞:小鼠单核巨噬细胞详细介绍及细胞培养注意事项
J774A.1细胞的价格受市场供需、供应商、规格(如细胞数量、是否含鉴定报告等)等因素影响,大致在人民币1000元至2000元之间。实际价格建议直接咨询多个合规生物制品供应商以获取最新报价。

J774A.1细胞

中英文名称

中文名称:J774A.1小鼠单核巨噬细胞

英文名称:J774A.1 Mouse Macrophage Cell Line


细胞概述

J774A.1细胞是一种源自小鼠单核巨噬细胞的细胞系,常用于免疫学、炎症研究、药物筛选、感染性疾病模型构建以及肿瘤生物学领域的多种实验。该细胞株保留了巨噬细胞的典型特征,如吞噬功能、表达巨噬细胞特异性标志物、参与免疫应答、炎症反应及肿瘤微环境调控等。作为实验模型,J774A.1细胞有助于深入理解巨噬细胞功能、免疫调节机制、病原体与宿主相互作用以及新型免疫调节药物的研发。


细胞参数分类

  1. 细胞形态:圆形或椭圆形,贴壁生长,有时形成片状或簇状结构。
  2. 生长特性:贴壁生长,细胞在培养基中附着于培养容器底部,形成单层或多层细胞群落。
  3. 组织来源:小鼠腹水,源自小鼠单核巨噬细胞。
  4. 遗传背景:具有巨噬细胞的遗传特征,如表达F4/80、CD11b、CD68等标志物。
  5. 药物敏感性:对某些影响巨噬细胞功能、炎症反应或免疫调节的药物可能表现出特定反应。
  6. STR鉴定:完成STR分析,确保细胞株的遗传稳定性。

J774A.1细胞价格范围

J774A.1细胞的价格受市场供需、供应商、规格(如细胞数量、是否含鉴定报告等)等因素影响,大致在人民币1000元至2000元之间。实际价格建议直接咨询多个合规生物制品供应商以获取最新报价。


选择J774A.1细胞购买渠道

资质认证:首选具备ISO、GMP、ATCC等国际或国内认可资质的供应商,确保细胞来源合规、质量有保证。

口碑评价:查阅同行评价、学术论文引用及生物试剂电商平台用户反馈,评估供应商的专业水平和服务质量。

技术支持:选择能提供详尽细胞培养手册、售后技术支持及细胞鉴定报告的商家。

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J774A.1细胞来源

J774A.1细胞源于小鼠腹水中的单核巨噬细胞,经过实验室分离、扩增和传代,形成了稳定的细胞株。此类细胞通常由国际知名的细胞库(如ATCC、DSMZ等)或经授权的生物技术公司提供。


J774A.1细胞储存及复苏方法

储存:J774A.1细胞可短期常温保存或长期液氮冻存。冻存时,将细胞与冻存液混合后装入冻存管,储存在液氮罐(-196℃)中。

复苏

  • 解冻:将冻存管迅速放入37℃水浴中,轻轻摇动直至冻存液完全融化。
  • 洗涤:弃去冻存液,用适量预热的完全培养基重悬细胞。
  • 接种:将细胞悬液均匀滴加到已添加合适培养基的培养容器中,置于37℃、5%CO₂培养箱中培养。

J774A.1细胞培养所需仪器设备及功能使用说明

  1. 细胞培养箱:维持恒定的温度(37℃)、湿度和CO₂浓度(5%),为J774A.1细胞提供稳定的生长环境。
  2. 倒置显微镜:观察J774A.1细胞形态、密度和生长状态,进行日常监测和拍照记录。
  3. 离心机:用于细胞传代时的收集与重悬,确保细胞均匀分散。
  4. 超净工作台:提供无菌操作条件,防止细胞培养过程中受到微生物污染。
  5. 移液器:精确吸取和分配培养基、细胞悬液及其他试剂。
  6. 培养皿/瓶/板:承载J774A.1细胞生长的容器,根据实验需求选用不同规格。
  7. 水浴锅:用于细胞冻存液的快速升温解冻。

J774A.1细胞培养步骤

  1. 配制培养基:按照要求配制完全培养基(如DMEM+10%热灭活胎牛血清+1%双抗)。
  2. 消毒工作区:使用酒精或消毒剂擦拭超净台表面。
  3. 启动培养箱:设定温度为37℃,CO₂浓度为5%,预热。
  4. 接种细胞:将复苏或传代后的J774A.1细胞均匀接种至预置培养基的培养容器中。
  5. 定期观察:每日或按需使用倒置显微镜检查J774A.1细胞状态。
  6. 更换培养基:根据细胞生长速率,定期更换新鲜培养基,清除代谢废物。
  7. 细胞传代:当J774A.1细胞密度达到适宜范围时,使用胰酶或EDTA等消化液处理,随后稀释并重新接种。

J774A.1细胞培养注意事项

  • 无菌操作:严格执行无菌操作规程,避免微生物污染。
  • 环境控制:保持恒定的培养条件,防止温度、湿度和气体环境波动。
  • 细胞计数:定期进行J774A.1细胞计数,准确调整细胞密度并判断传代时机。
  • 定期检测:定期进行支原体检测,确保无潜在污染。
  • 试剂质量:使用合格、无菌、未过期的培养基和试剂。
  • 药物敏感性:在相关实验中,注意细胞对特定影响巨噬细胞功能、炎症反应或免疫调节的药物的反应性。

J774A.1细胞培养常见问题及解决方法

问题:J774A.1细胞生长缓慢或停滞。 解决:检查培养基成分、pH值、CO₂浓度是否适宜,考虑更换供应商或批次。排查是否存在污染。

问题:J774A.1细胞形态异常或生长过快。 解决:观察细胞是否存在扁平化、空泡化、脱落等现象,或生长速度远超正常范围,可能是污染、营养不良或过度传代所致,需调整培养条件或进行细胞复苏。


如何鉴别J774A.1细胞品质

  1. 形态观察:J774A.1细胞应保持典型的圆形或椭圆形巨噬细胞形态,无明显病理变化或异形细胞。
  2. 生长曲线:正常J774A.1细胞应显示出稳定的增殖趋势,与文献报道或供应商提供的信息相符。
  3. 免疫荧光验证:通过荧光标记抗体检测细胞内F4/80、CD11b、CD68等标志物的表达,确认其巨噬细胞特性。
  4. 功能验证:评估细胞的吞噬功能、炎症因子释放、免疫应答相关基因的表达等,以确认其与巨噬细胞的特征相符。
  5. 遗传验证:通过STR分析,确认细胞株的遗传稳定性。
  6. 支原体检测:确保细胞无支原体污染。

J774A.1细胞应用领域

J774A.1细胞广泛应用于:

  • 免疫学与炎症研究:探究巨噬细胞功能、免疫调节机制、炎症反应与疾病关联。
  • 药物筛选与药理学研究:测试抗炎药物、免疫调节药物或候选化合物对巨噬细胞功能的影响,评估其对吞噬活性、炎症因子分泌、细胞存活等指标的效应。
  • 感染性疾病模型构建:模拟细菌、病毒、寄生虫感染过程中巨噬细胞与病原体的相互作用。
  • 肿瘤生物学研究:研究巨噬细胞在肿瘤微环境中的作用,如免疫逃逸、肿瘤进展、免疫治疗反应等。
  • 疾病模型构建:模拟巨噬细胞介导的炎症性疾病、免疫缺陷状态等病理状态。
  • 基因功能研究:通过基因编辑、过表达或敲减等技术,研究与巨噬细胞功能、免疫反应、炎症调控相关的基因。

全文总结:

J774A.1小鼠单核巨噬细胞作为免疫学、炎症研究、药物筛选、感染性疾病模型构建以及肿瘤生物学领域的重要模型,对于揭示巨噬细胞功能、免疫调节机制、病原体与宿主相互作用以及新型免疫调节药物的研发具有重要作用。选购时应关注供应商资质、市场口碑、技术支持及细胞来源,确保细胞储存复苏方法正确、培养过程规范。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日14:04:35
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