hTERT-HPNE细胞:人胰腺导管上皮细胞详细介绍及细胞培养注意事项

hTERT-HPNE细胞:人胰腺导管上皮细胞详细介绍及细胞培养注意事项
hTERT-HPNE细胞的价格受市场供需、供应商、规格(如细胞数量、是否含鉴定报告等)等因素影响,大致在人民币1000元至2000元之间。实际价格建议直接咨询多个合规生物制品供应商以获取最新报价。

中英文名称

中文名称:hTERT-HPNE人正常胰腺导管上皮细胞

英文名称:hTERT-HPNE Human Normal Pancreatic Ductal Epithelial Cells


细胞概述

hTERT-HPNE细胞是一种源自人正常胰腺导管上皮组织的细胞系,通过转染人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因赋予细胞永生化特性,常用于胰腺生理学、胰腺疾病研究、药物筛选、糖尿病研究以及细胞生物学领域的多种实验。该细胞株保留了正常胰腺导管上皮细胞的典型特征,如上皮细胞样形态、分泌胰酶的能力、对胰岛素及葡萄糖响应的特性,为深入研究胰腺功能、胰腺疾病的发生机制、药物筛选以及胰岛细胞相互作用提供了重要的体外模型。


细胞参数分类

  1. 细胞形态:上皮细胞样,呈立方形或柱状,排列成单层或假复层结构。
  2. 生长特性:贴壁生长,细胞在培养基中附着于培养容器底部,形成紧密连接的细胞群落。
  3. 组织来源:人正常胰腺导管上皮,源自健康供体或手术切除样本。
  4. 遗传修饰:稳定转染hTERT基因,赋予细胞永生化能力。
  5. 功能特性:分泌胰酶、响应胰岛素及葡萄糖刺激,保持部分正常胰腺导管上皮细胞功能。
  6. STR鉴定:完成STR分析,确保细胞株的遗传稳定性。

hTERT-HPNE细胞价格范围

hTERT-HPNE细胞的价格受市场供需、供应商、规格(如细胞数量、是否含鉴定报告等)等因素影响,大致在人民币1000元至2000元之间。实际价格建议直接咨询多个合规生物制品供应商以获取最新报价。


选择hTERT-HPNE细胞购买渠道

资质认证:首选具备ISO、GMP、ATCC等国际或国内认可资质的供应商,确保细胞来源合规、质量有保证。

口碑评价:查阅同行评价、学术论文引用及生物试剂电商平台用户反馈,评估供应商的专业水平和服务质量。

技术支持:选择能提供详尽细胞培养手册、售后技术支持及细胞鉴定报告的商家。

订购流程:确保购买流程清晰,包括询价、下单、支付、发货、售后等环节均有明确指引和保障。


hTERT-HPNE细胞来源

hTERT-HPNE细胞源于人正常胰腺导管上皮组织样本,经过实验室分离、转染hTERT基因、扩增和传代,形成了稳定的细胞株。此类细胞通常由国际知名的细胞库(如ATCC、DSMZ等)或经授权的生物技术公司提供。


hTERT-HPNE细胞储存及复苏方法

储存:hTERT-HPNE细胞可短期常温保存或长期液氮冻存。冻存时,将细胞与冻存液混合后装入冻存管,储存在液氮罐(-196℃)中。

复苏

  • 解冻:将冻存管迅速放入37℃水浴中,轻轻摇动直至冻存液完全融化。
  • 洗涤:弃去冻存液,用适量预热的完全培养基重悬细胞。
  • 接种:将细胞悬液均匀滴加到已添加合适培养基的培养容器中,置于37℃、5%CO₂培养箱中培养。

hTERT-HPNE细胞培养所需仪器设备及功能使用说明

  1. 细胞培养箱:维持恒定的温度(37℃)、湿度和CO₂浓度(5%),为hTERT-HPNE细胞提供稳定的生长环境。
  2. 倒置显微镜:观察hTERT-HPNE细胞形态、密度和生长状态,进行日常监测和拍照记录。
  3. 离心机:用于细胞传代时的收集与重悬,确保细胞均匀分散。
  4. 超净工作台:提供无菌操作条件,防止细胞培养过程中受到微生物污染。
  5. 移液器:精确吸取和分配培养基、细胞悬液及其他试剂。
  6. 培养皿/瓶/板:承载hTERT-HPNE细胞生长的容器,根据实验需求选用不同规格。
  7. 水浴锅:用于细胞冻存液的快速升温解冻。

hTERT-HPNE细胞培养步骤

  1. 配制培养基:按照要求配制完全培养基(如DMEM+10%FBS+1%双抗)。
  2. 消毒工作区:使用酒精或消毒剂擦拭超净台表面。
  3. 启动培养箱:设定温度为37℃,CO₂浓度为5%,预热。
  4. 接种细胞:将复苏或传代后的hTERT-HPNE细胞均匀接种至预置培养基的培养容器中。
  5. 定期观察:每日或按需使用倒置显微镜检查hTERT-HPNE细胞状态。
  6. 更换培养基:根据细胞生长速率,定期更换新鲜培养基,清除代谢废物。
  7. 细胞传代:当hTERT-HPNE细胞密度达到适宜范围时,使用胰酶或EDTA等消化液处理,随后稀释并重新接种。

hTERT-HPNE细胞培养注意事项

  • 无菌操作:严格执行无菌操作规程,避免微生物污染。
  • 环境控制:保持恒定的培养条件,防止温度、湿度和气体环境波动。
  • 细胞计数:定期进行hTERT-HPNE细胞计数,准确调整细胞密度并判断传代时机。
  • 定期检测:定期进行支原体检测,确保无潜在污染。
  • 试剂质量:使用合格、无菌、未过期的培养基和试剂。
  • 功能检测:在相关实验中,注意检测细胞的胰酶分泌、对胰岛素及葡萄糖响应等功能。

hTERT-HPNE细胞培养常见问题及解决方法

问题:hTERT-HPNE细胞生长缓慢或停滞。 解决:检查培养基成分、pH值、CO₂浓度是否适宜,考虑更换供应商或批次。排查是否存在污染。

问题:hTERT-HPNE细胞形态异常或功能丧失。 解决:观察细胞是否存在扁平化、空泡化、脱落等现象,或失去分泌胰酶、响应胰岛素及葡萄糖的能力,可能是培养条件不当或细胞活力下降,需调整培养条件或进行细胞复苏。


如何鉴别hTERT-HPNE细胞品质

  1. 形态观察:hTERT-HPNE细胞应保持典型的上皮细胞形态,无明显病理变化或异形细胞。
  2. 生长曲线:正常hTERT-HPNE细胞应显示出稳定的增殖趋势,与文献报道或供应商提供的信息相符。
  3. 遗传验证:通过STR分析,确认细胞株的遗传稳定性。
  4. 功能验证:评估细胞的胰腺导管上皮细胞特异性标志物表达、胰酶分泌、对胰岛素及葡萄糖响应等,以确认其与正常胰腺导管上皮细胞的特征相符。
  5. 支原体检测:确保细胞无支原体污染。

hTERT-HPNE细胞应用领域

hTERT-HPNE细胞广泛应用于:

  • 胰腺生理学研究:探究胰腺导管上皮细胞的功能,如胰酶分泌、细胞间通讯等。
  • 胰腺疾病研究:模拟胰腺炎、胰腺癌等疾病状态下导管上皮细胞的变化,研究疾病发生机制。
  • 药物筛选与药效评价:测试对胰腺功能有影响的药物或候选化合物,评估其对细胞功能、胰酶分泌及葡萄糖代谢的影响。
  • 糖尿病研究:研究胰腺导管上皮细胞在胰岛功能调控、胰岛素分泌及葡萄糖稳态维持中的作用。
  • 基因功能研究:通过基因编辑、过表达或敲减等技术,研究与胰腺导管上皮细胞功能相关的基因功能。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:33:12
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匿名

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