HPAF-II细胞:人胰腺癌细胞详细介绍及细胞培养注意事项

HPAF-II细胞:人胰腺癌细胞详细介绍及细胞培养注意事项
HPAF-II人胰腺癌细胞作为一种重要的体外模型,其购买需关注供应商资质、细胞品质及完整数据支持。细胞复苏、培养过程中涉及严格的无菌操作、适宜的培养条件和细致的生长监控。在细胞出现问题时,应结合细胞生长特性进行分析并采取针对性解决措施。鉴别细胞品质则需通过形态学、生长性能及分子鉴定等方式。HPAF-II细胞广泛应用于胰腺癌病理生理、药物研发和肿瘤生物学等多个研究领域。

HPAF-II细胞概述

HPAF-II细胞是一种来源于人胰腺腺癌患者的恶性细胞系,源自一位44岁的白人男性的腹腔积液样本,具有胰腺导管腺癌特性。此细胞系在科学研究中主要用于探讨胰腺癌的发生机制、药物敏感性、侵袭转移能力以及治疗策略等相关研究,因为它们能够持续增殖并在体外表现出与体内相似的生物学行为。


HPAF-II细胞中英文名称

  • 中文名称:HPAF-II人胰腺癌细胞
  • 英文名称:HPAF-II Human Pancreatic Adenocarcinoma Cells

HPAF-II细胞参数分类整理介绍

HPAF-II细胞特性概览:

  1. 种属:人类
  2. 年龄/性别:44岁,男性
  3. 组织来源:胰腺导管腺癌
  4. 生长特性:贴壁生长
  5. 培养条件:通常使用DMEM高糖培养基搭配10% FBS和1% P/S抗生素混合液
  6. 传代方法:一般1:2比例传代,3-4天传一代
  7. 冻存条件:使用含有90% FBS和10% DMSO的冻存液进行液氮冷冻保存
  8. 纯度规格:经STR鉴定确认身份

HPAF-II细胞购买价格

HPAF-II细胞的具体价格会因供应商、包装规格(如细胞数量、是否包括STR鉴定等附加服务)、运输成本等因素而变化,大致价格范围可能在几百到上千元人民币之间,实际购买时需要联系专业生物制品供应商询价。


如何选择购买HPAF-II细胞的渠道

  1. 资质认证:选购HPAF-II细胞时,应选择具有权威机构认证和良好信誉的细胞库或生物制品公司,确保细胞来源清晰,符合伦理规定。
  2. 细胞质量:要求提供详尽的细胞系历史、最近的STR鉴定结果、无菌检测证明以及详细的细胞培养手册。
  3. 售后服务和技术支持:确保供应商能够提供全面的技术支持,包括细胞复苏、培养指导及售后咨询服务。

HPAF-II细胞来源、储存及复苏方法

细胞来源:HPAF-II细胞源于患者临床样本,经过体外培养获得。

细胞储存:细胞在液氮中长期保存,先将其悬浮于含冻存保护剂的冻存液中,然后放置在液氮容器内。

细胞复苏流程

  1. 小心快速取出冻存管,立即投入37°C水浴中进行解冻。
  2. 待冻存液全部融化后,将细胞转移到灭菌离心管中。
  3. 使用预热的完全培养基洗涤细胞,离心去除冻存液。
  4. 悬浮细胞于适量的新鲜完全培养基中,再接种到预先准备好的培养皿或培养瓶中,置于37°C、5% CO2培养箱中培养。

HPAF-II细胞培养所需仪器设备

  • 二氧化碳培养箱:提供稳定的37°C恒温和5% CO2环境。
  • 倒置显微镜:用于观察细胞形态、生长状态及计数。
  • 离心机:用于细胞收获、清洗和重悬操作。
  • 液氮储存系统:用于细胞冷冻保存。
  • 超净工作台:实施无菌操作。
  • 细胞培养耗材:培养皿、培养瓶、离心管、移液器、吸头等。

HPAF-II细胞培养步骤详细说明

  1. 细胞复苏与接种:按照上述复苏步骤操作,将复苏后的细胞稀释至适当的接种密度,移植到已消毒并添加合适饲养层的培养皿或瓶中。
  2. 初始培养:将接种细胞的器具放入37°C、5% CO2的培养箱中,让细胞适应环境并开始生长。
  3. 日常维护:根据细胞生长速度,每隔一定时间更换新鲜培养基,通常每2-3天更换一次。
  4. 细胞传代:当细胞达到80%-90%汇合度时,使用胰酶或其他适当的消化液分离细胞,离心后用新鲜培养基重悬并按1:2的比例传代到新的培养器皿中。

HPAF-II细胞培养注意事项

  • 严格无菌操作:所有的细胞操作应在超净工作台内完成,避免微生物污染。
  • 监控细胞状态:定期检查细胞形态、生长速度及健康状况,发现问题应及时调整培养条件或寻求技术支持。
  • 记录管理:详尽记录细胞传代次数、生长情况、使用过的培养基批号等重要信息。

HPAF-II细胞培养常见问题及解决方法

问题1:细胞生长缓慢或死亡率高

  • 可能原因:培养条件不当、培养基失效或细胞过期。
  • 解决办法:检查培养条件,更新新鲜培养基,如果有必要,重新购买新鲜的细胞批次。

问题2:细胞形态异常

  • 可能原因:培养基成分不匹配、污染或细胞老化。
  • 解决办法:核查所用培养基配方,排除污染,适时更换年轻代细胞。

如何鉴别HPAF-II细胞品质

  • 形态学鉴定:通过显微镜观察细胞形态和排列,对照文献资料确认是否符合HPAF-II细胞的标准特征。
  • 生长性能测定:评估细胞的生长速率、倍增时间和代数,高质量的细胞应具备良好的生长能力和较长的传代寿命。
  • 分子生物学鉴定:利用STR分型技术进行遗传学验证,确保细胞系的遗传一致性。

HPAF-II细胞应用领域

  • 胰腺癌研究:用于胰腺癌发生、发展机制的研究,以及药物靶点发现与验证。
  • 药物筛选与药效评价:作为体外模型筛选针对胰腺癌的候选药物,并测试药物的毒性和效果。
  • 肿瘤生物学研究:探索胰腺癌的侵袭、转移及耐药机制等方面的基础研究。

全文总结

HPAF-II人胰腺癌细胞作为一种重要的体外模型,其购买需关注供应商资质、细胞品质及完整数据支持。细胞复苏、培养过程中涉及严格的无菌操作、适宜的培养条件和细致的生长监控。在细胞出现问题时,应结合细胞生长特性进行分析并采取针对性解决措施。鉴别细胞品质则需通过形态学、生长性能及分子鉴定等方式。HPAF-II细胞广泛应用于胰腺癌病理生理、药物研发和肿瘤生物学等多个研究领域。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:30:08
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