HL-60细胞:人原髓细胞白血病细胞详细介绍及细胞培养注意事项

HL-60细胞:人原髓细胞白血病细胞详细介绍及细胞培养注意事项
HL-60细胞的价格受市场供需、供应商、规格(如细胞数量、是否含鉴定报告等)以及市场需求的不同而有所波动,通常在人民币1000元至2000元之间。实际售价请咨询多家合规生物制品供应商以获取最新报价。

HL-60细胞

中英文名称

中文名称:HL-60人早幼粒急性白血病细胞

英文名称:HL-60 Human Promyelocytic Leukemia Cells


细胞概述

HL-60细胞是一种源自人早幼粒急性白血病患者的细胞系,广泛用于白血病研究、药物筛选、细胞分化机制探究以及血液学相关领域的基础和应用研究。该细胞株保留了早幼粒细胞的特征,如可诱导分化为成熟的粒细胞、表达特定的白血病相关抗原、对某些化疗药物敏感等。作为实验模型,HL-60细胞为理解白血病发病机制、药物作用机制、细胞分化调控等方面提供了重要平台。


细胞参数分类

  1. 细胞形态:圆形或椭圆形,悬浮生长,部分细胞可呈现伪足。
  2. 生长特性:悬浮生长,细胞在培养液中自由游动。
  3. 组织来源:人早幼粒急性白血病患者血液或骨髓。
  4. 免疫表型:表达CD13、CD33、CD11b等白血病相关抗原。
  5. 遗传背景:具有人早幼粒白血病特有的基因突变、染色体异常和表观遗传修饰。
  6. 药物敏感性:对某些化疗药物(如全反式维甲酸、三氧化二砷等)具有分化诱导作用。
  7. STR鉴定:完成STR分析,确保细胞株的遗传稳定性。

HL-60细胞价格范围

HL-60细胞的价格受市场供需、供应商、规格(如细胞数量、是否含鉴定报告等)以及市场需求的不同而有所波动,通常在人民币1000元至2000元之间。实际售价请咨询多家合规生物制品供应商以获取最新报价。


选择HL-60细胞购买渠道

资质认证:优先考虑持有ISO、GMP、ATCC等国际或国内权威机构认证的供应商,确保细胞来源合法、质量可靠。

口碑评价:查阅同行评价、学术论文引用及生物试剂电商平台用户反馈,评估供应商的信誉和服务质量。

技术支持:选择能提供详细细胞培养手册、售后技术支持及细胞鉴定报告的商家。

订购流程:确保购买流程清晰,包括询价、下单、支付、发货、售后等环节均有明确指引和保障。


HL-60细胞来源

HL-60细胞起源于1977年由Lozzio夫妇从一名患有早幼粒急性白血病患者的血液或骨髓样本中分离建立,并已成功传代多代。这些细胞通常由国际知名细胞库(如ATCC、DSMZ等)或授权的生物技术公司提供。


HL-60细胞储存及复苏方法

储存:HL-60细胞可短期常温保存或长期液氮冻存。冻存时,将细胞与冻存液混合后装入冻存管,储存在液氮罐(-196℃)中。

复苏

  • 解冻:将冻存管迅速放入37℃水浴中,轻轻摇动直至冻存液完全融化。
  • 洗涤:弃去冻存液,用适量预热的完全培养基重悬细胞。
  • 接种:将细胞悬液均匀滴加到已添加合适培养基的培养容器中,置于37℃、5%CO₂培养箱中培养。

HL-60细胞培养所需仪器设备及功能使用说明

  1. 细胞培养箱:维持恒定的温度(37℃)、湿度和CO₂浓度(5%),为HL-60细胞提供稳定的生长环境。
  2. 倒置显微镜:观察HL-60细胞形态、密度和生长状态,进行日常监测和拍照记录。
  3. 离心机:用于细胞传代时的收集与重悬,确保细胞均匀分散。
  4. 超净工作台:提供无菌操作条件,防止细胞培养过程中受到微生物污染。
  5. 移液器:精确吸取和分配培养基、细胞悬液及其他试剂。
  6. 培养瓶/板:承载HL-60细胞生长的容器,根据实验需求选用不同规格。
  7. 水浴锅:用于细胞冻存液的快速升温解冻。

HL-60细胞培养步骤

  1. 配制培养基:按照要求配制完全培养基(如RPMI1640+10%胎牛血清)。
  2. 消毒工作区:使用酒精或消毒剂擦拭超净台表面。
  3. 启动培养箱:设定温度为37℃,CO₂浓度为5%,预热。
  4. 接种细胞:将复苏或传代后的HL-60细胞均匀接种至预置培养基的培养容器中。
  5. 定期观察:每日或按需使用倒置显微镜检查HL-60细胞状态。
  6. 更换培养基:根据细胞生长速率,定期更换新鲜培养基,清除代谢废物。
  7. 细胞传代:当HL-60细胞密度达到适宜范围时,使用离心法收集细胞,重新接种至新鲜培养基中。

HL-60细胞培养注意事项

  • 无菌操作:严格执行无菌操作规程,避免微生物污染。
  • 环境控制:保持恒定的培养条件,防止温度、湿度和气体环境波动。
  • 细胞计数:定期进行HL-60细胞计数,准确调整细胞密度并判断传代时机。
  • 定期检测:定期进行支原体检测,确保无潜在污染。
  • 试剂质量:使用合格、无菌、未过期的培养基和试剂。
  • 药物敏感性:在相关实验中,注意细胞对化疗药物、分化诱导剂的反应性。

HL-60细胞培养常见问题及解决方法

问题:HL-60细胞生长缓慢或停滞。 解决:检查培养基成分、pH值、CO₂浓度是否适宜,考虑更换供应商或批次。排查是否存在污染。

问题:HL-60细胞形态异常或生长过快。 解决:观察细胞是否存在变形、聚集、破碎等现象,或生长速度远超正常范围,可能是污染、营养不良或过度传代所致,需调整培养条件或进行细胞复苏。


如何鉴别HL-60细胞品质

  1. 形态观察:HL-60细胞应保持圆形或椭圆形,悬浮生长,无明显病理变化或异形细胞。
  2. 生长曲线:正常HL-60细胞应显示出稳定的增殖趋势,与文献报道或供应商提供的信息相符。
  3. 免疫表型验证:通过流式细胞术检测细胞内CD13、CD33、CD11b等白血病相关抗原的表达,确认其白血病细胞特性。
  4. 遗传验证:通过STR分析,确认细胞株的遗传稳定性。
  5. 功能验证:评估细胞对全反式维甲酸、三氧化二砷等分化诱导剂的反应,以及相关基因表达变化,以确认其与早幼粒白血病细胞的特征相符。
  6. 支原体检测:确保细胞无支原体污染。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:41:54
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