H9c2(2-1)细胞:大鼠心肌细胞细胞详细介绍及细胞培养注意事项

H9c2(2-1)细胞:大鼠心肌细胞细胞详细介绍及细胞培养注意事项
H9c2细胞作为一种大鼠胚胎心肌细胞永生化细胞系,因其在心血管研究中的独特优势,受到了广泛的关注和应用。在购买和培养这类细胞时,科研人员应着重考虑细胞来源的合法性、细胞品质的保证以及供应商提供的服务支持。遵循严格的无菌操作规程和细胞培养流程,及时解决细胞培养过程中出现的问题,并通过科学的方法鉴定细胞品质,才能确保实验数据的准确性和实验的成功实施。通过H9c2细胞的应用研究,可以进一步加深对心血管疾病的理解,推动新药研发和治疗策略的发展。

1. H9c2(2-1)细胞概述

H9c2细胞是一种源自大鼠胚胎心肌细胞的永生化细胞系,因其来源于正常心肌细胞并保留了许多心肌细胞的生物学特性,因此广泛应用于心血管疾病研究、药物筛选、细胞信号转导以及心肌细胞损伤和修复机制的探索等领域。H9c2细胞在体外具有良好的培养性能和稳定的生长周期,是心肌细胞研究中的常用模型。


2. H9c2(2-1)细胞说明书与参数

  • 细胞名称:H9c2细胞
  • 组织来源:大鼠胚胎心肌组织
  • 细胞特性:贴壁生长,呈心肌细胞样形态,具有一定的收缩性及对特定药物的反应性
  • 培养条件:通常使用DMEM培养基,添加10%胎牛血清,并在37°C、5% CO2的恒温恒湿环境中培养

3. H9c2(2-1)细胞市场价格

在中国市场上,H9c2细胞的价格会受到不同供应商、细胞质量(包括STR鉴定、无菌性、细胞活力等)、细胞数量等因素的影响,单批次细胞的售价大致在人民币1000元至3000元的区间内,实际价格需向相关供应商咨询获取最新信息。


4. 如何选择公司购买H9c2(2-1)细胞

  • 公司资质:优先选择具有正规资质、良好信誉以及丰富经验的生物制品公司或细胞库。
  • 细胞质量保证:确保购买的H9c2细胞经过STR鉴定、无菌检测合格,提供详细的细胞代数、活力及来源信息。
  • 技术服务支持:考虑供应商是否提供详尽的细胞培养指南、技术支持及售后服务。

5. H9c2(2-1)细胞类型说明

  • 细胞类型:大鼠胚胎心肌细胞永生化细胞系
  • 细胞特性细分:H9c2细胞虽然已永生化,但仍保留了一部分心肌细胞的功能,如对缺氧、药物诱导的心肌毒性有一定的反应性。

6. H9c2(2-1)细胞来源、特性与类型

  • 来源:H9c2细胞起源于大鼠胚胎心脏组织,经过转化获得了无限增殖的能力。
  • 细胞特性:体外培养时,H9c2细胞具有相对稳定的增殖能力,可在一定条件下表达心肌细胞的标志物,并能响应一些刺激而产生相应的生理反应。
  • 细胞类型:作为心肌细胞模型,H9c2细胞在心血管研究中被用来模拟心肌细胞的行为和功能。

7. H9c2(2-1)细胞培养所需仪器设备

  • 培养箱:37°C、5% CO2的恒温恒湿二氧化碳培养箱
  • 离心机:用于细胞收集、洗涤和浓缩
  • 倒置显微镜:观察细胞形态、生长状态及细胞接种
  • 细胞培养瓶、皿、管:进行细胞培养和传代操作
  • 液氮罐和冻存管:用于细胞的长期储存和复苏
  • 水浴锅或加热板:用于细胞冻存液的解冻

8. H9c2(2-1)细胞储存及复苏方法

  • 储存:将H9c2细胞与冻存保护液混合后,保存在液氮中长期储存。
  • 复苏流程
    1. 解冻:将冻存管迅速放入37°C水浴中,直至细胞完全融化。
    2. 转移细胞:将细胞悬液转移到预冷的离心管中。
    3. 离心与清洗:温和离心后弃去冻存液,用预热的完全培养基清洗细胞。
    4. 重悬与接种:用新鲜的完全培养基将细胞重悬后,均匀接种到预处理好的培养容器中。

9. H9c2(2-1)细胞培养步骤(详细版)

  • 培养基制备:根据供应商提供的指南,配制含10%胎牛血清的DMEM培养基。
  • 细胞接种:将复苏或传代后的细胞悬液均匀接种于培养瓶底部。
  • 细胞培养:将接种细胞的容器放入37°C、5% CO2的培养箱中培养,每日观察细胞生长状态。
  • 换液与传代:每2-3天更换新鲜培养基,当细胞融合率达到80%-90%时,使用胰酶或EDTA-胰酶混合液消化细胞,然后按一定比例进行细胞传代。

10. H9c2(2-1)细胞培养注意事项

  • 无菌操作:所有的细胞操作应在超净工作台上进行,确保无菌环境。
  • 环境控制:维持恒定的温度、湿度和CO2浓度。
  • 细胞状态监测:定期通过显微镜观察细胞形态、生长速度以及有无污染迹象。

11. H9c2(2-1)细胞培养常见问题与解决方案

  • 生长缓慢或停滞:检查培养基的新鲜度、血清批次以及细胞接种密度,必要时更换新鲜培养基或调整细胞接种密度。
  • 细胞形态异常:确认培养条件稳定,排除物理、化学因素以及微生物污染。

12. 鉴定H9c2(2-1)细胞品质

  • 形态学鉴定:通过显微镜观察细胞形态是否符合H9c2细胞的典型特征。
  • 细胞活力检测:利用台盼蓝染色法或ATP活性检测法评估细胞活力。
  • 基因表达分析:通过RT-PCR或Western Blot检测心肌细胞特异基因和蛋白的表达,以验证细胞特性。

13. H9c2(2-1)细胞应用领域

  • 心血管疾病研究:用于研究心肌细胞的增殖、分化、凋亡和炎症反应等基本生理和病理过程。
  • 药物筛选与毒性评价:作为模型细胞,用于评估候选药物对心肌细胞的毒性效应和保护作用。
  • 基因功能研究:通过基因转染或基因编辑技术研究特定基因在心肌细胞功能和疾病发生中的作用。

全文总结

H9c2细胞作为一种大鼠胚胎心肌细胞永生化细胞系,因其在心血管研究中的独特优势,受到了广泛的关注和应用。在购买和培养这类细胞时,科研人员应着重考虑细胞来源的合法性、细胞品质的保证以及供应商提供的服务支持。遵循严格的无菌操作规程和细胞培养流程,及时解决细胞培养过程中出现的问题,并通过科学的方法鉴定细胞品质,才能确保实验数据的准确性和实验的成功实施。通过H9c2细胞的应用研究,可以进一步加深对心血管疾病的理解,推动新药研发和治疗策略的发展。

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  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:25:27
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