DU145细胞_人前列腺癌细胞

DU145细胞_人前列腺癌细胞

DU145(人前列腺癌细胞)(STR鉴定正确)
细胞名称
DU145(人前列腺癌细胞)(STR鉴定正确)

细胞别称
DU-145; Du-145; DU 145; DU_145; DU.145; Duke University 145

细胞货号
SNL-129

来源
前列腺癌;脑转移;男性;69岁

细胞形态
上皮细胞样

细胞类型
肿瘤细胞

生长特性
贴壁细胞

收录
ATCC

生物安全等级
1

致瘤性
Yes, in nude mice; forms adenocarcinoma (grade II) consistent with prostatic primary

培养条件
DMEM+10% FBS+1% P/S

培养环境
空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%

细胞简介
DU145细胞是从患有前列腺癌的69岁白人男性大脑中分离出来的。DU145细胞对激素不敏感,仅对酸性磷酸酶有弱反应,分离的细胞在软琼脂中可以形成集落。DU145细胞不表达前列腺抗原,细胞系和原始肿瘤的超微结构分析显示细胞存在微绒毛、张力丝、桥粒、任一线粒体、发育良好的高尔基体和异质溶酶体。DU145细胞在裸鼠中可以形成与原发性前列腺癌一致的腺癌(II级)。DU145细胞可以用于3D细胞培养,癌症研究和神经科学研究,也是一种合适的转染宿主。

换液周期
2-3天

培养基体积
T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml

传代比例
1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法
1.尽量吸干净T25瓶原培养基;

2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;

3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;

4.将培养瓶放入37度培养箱消化;

5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;

6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;

7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;

8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;

注意事项
不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间

消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

冻存液配方
92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);

冻存规格
200-300万/ml,1ml每管

冻存方法
1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;

2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;

3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

注意事项
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

weinxin
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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:39:23
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匿名

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