CHO细胞:仓鼠卵巢细胞详细介绍及细胞培养注意事项

CHO细胞:仓鼠卵巢细胞详细介绍及细胞培养注意事项
CHO仓鼠卵巢细胞因其优良的生物学性质和大规模生产的潜力而在生物技术和医药领域扮演重要角色。购买时应着重考察供应商资质、细胞品质及配套服务,掌握正确的细胞复苏、培养和管理技巧,遇到问题时灵活运用科学方法予以解决,以确保实验结果的可靠性和有效性。
  1. CHO细胞概述

    • CHO(Chinese Hamster Ovary)仓鼠卵巢细胞是一种广泛应用的哺乳动物细胞系,主要用于重组蛋白生产、药物筛选、基因表达研究以及基础细胞生物学研究。
  2. CHO细胞参数

    • 细胞纯度:一般提供为≥90%的细胞活力。
    • 推荐接种密度:根据不同供应商推荐,可能为1x10^5 至 1x10^6 cells/cm²。
    • 货号举例:如JK-R1746(晶抗生物)、ZQ0105(中乔新舟)等。
    • 市场价格区间:CHO细胞的价格因品牌、包装规格、服务内容等因素不同,通常在几百至上千元人民币之间。
  3. 选择购买CHO细胞渠道

    • 认证供应商:选择拥有GMP或ISO认证的细胞库,比如上海晶抗生物工程有限公司、上海中乔新舟生物科技有限公司等。
    • 细胞质量保障:确保供应商能提供细胞鉴定报告、无菌检测报告和完整的细胞系背景资料。
    • 服务质量:考虑供应商是否提供详尽的操作指南、售后技术支持和咨询服务。
  4. CHO细胞类型与特性

    • 细胞来源:CHO细胞源自中国仓鼠的卵巢组织。
    • 细胞特性:CHO细胞属于贴壁生长型,可在适当的培养条件下持续增殖,具有较高的稳定性和适应力。
    • 细胞类型:主要分为未转化的CHO-K1细胞、经过基因工程改造的高表达CHO细胞系等。
  5. CHO细胞储存与复苏

    • 储存方法:细胞常采用液氮冷冻储存,使用含有保护剂的冻存液以减少冰晶损伤。
    • 复苏步骤:
      • 从液氮中取出细胞冻存管,迅速投入37℃水浴中使其快速融化。
      • 小心吸取融化后的细胞悬液加入预热的完全培养基中。
      • 温和混匀后离心,弃上清,用新鲜培养基重悬细胞。
      • 将细胞均匀接种至预处理过的培养瓶或板中,置37℃、5% CO2培养箱中培养。
  6. CHO细胞培养步骤详解

    • 步骤1: 准备好DMEM/F12或其他指定培养基,添加10% FBS等补充成分。
    • 步骤2: 对培养器皿进行预处理,包被或涂抹适宜的细胞吸附材料。
    • 步骤3: 按照推荐接种密度接种细胞。
    • 步骤4: 将细胞放入恒温、恒湿、5% CO2的培养箱中培养。
    • 步骤5: 观察细胞生长状况,根据细胞密度适时传代。
    • 步骤6: 更换新鲜培养基,保持无菌操作,每次传代记录细胞生长数据。
  7. CHO细胞培养注意事项

    • 注意1: 所有接触细胞的物品必须严格无菌。
    • 注意2: 细胞培养条件需稳定,包括温度、气体比例、湿度。
    • 注意3: 定期更换培养基,避免代谢产物积累影响细胞健康。
    • 注意4: 观察细胞形态和生长状态,及时发现并处理问题。
  8. CHO细胞常见问题及解决方法

    • 问题1: 细胞贴壁不佳,可能原因:培养条件不合适或细胞老化。解决方法:调整培养条件或尝试新批次细胞。
    • 问题2: 细胞死亡率高,可能原因:复苏不当或污染。解决方法:遵循正确的复苏程序,确保无菌操作。
    • 问题3: 细胞生长缓慢,可能原因:营养不足或细胞密度太高。解决方法:增加培养基更换频率或降低细胞密度。
  9. CHO细胞鉴别细胞品质

    • 外观判别:通过显微镜观察细胞形态是否正常、排列整齐、活性高。
    • 生长特性:记录细胞倍增时间、生长曲线,对比文献报道数据判断细胞活性。
    • 遗传稳定性:进行STR分析或特定基因表达水平检测,确认细胞系真实性。
  10. CHO细胞应用领域

    • 生物制药:CHO细胞是重组蛋白药物尤其是抗体药物工业化生产的首选宿主细胞之一。
    • 基础研究:利用CHO细胞进行基因转染、蛋白质翻译后修饰、药物效应研究等。
    • 细胞工程:通过基因编辑手段改良CHO细胞,提高药物产量或改善产品质量。

总结:CHO仓鼠卵巢细胞因其优良的生物学性质和大规模生产的潜力而在生物技术和医药领域扮演重要角色。购买时应着重考察供应商资质、细胞品质及配套服务,掌握正确的细胞复苏、培养和管理技巧,遇到问题时灵活运用科学方法予以解决,以确保实验结果的可靠性和有效性。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日11:47:38
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