CHO细胞:仓鼠卵巢细胞细胞详细介绍及细胞培养注意事项

CHO细胞:仓鼠卵巢细胞细胞详细介绍及细胞培养注意事项
CHO细胞作为一种广泛应用的生物工程技术平台,对于生物医药产品的研发与生产至关重要。在选购和培养CHO细胞的过程中,科研人员应关注细胞来源的合法性、品质保证及供应商的专业技术服务。掌握细胞复苏、培养、传代等关键技术,及时解决常见问题,并通过科学方法鉴定细胞品质,能够确保实验结果的准确性和实验的成功实施。CHO细胞在生物医药领域尤其是在重组蛋白药物生产方面具有重大贡献,同时也为分子生物学和药物研究提供了有力的支持。

1. CHO细胞概述

CHO细胞,即中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary Cells),是一种源自中国仓鼠卵巢组织的连续细胞系。CHO细胞以其稳定的遗传特性、易于培养、高表达外源基因和生产高质量重组蛋白的能力而闻名,在生物医药行业中被广泛应用,特别是作为重组蛋白药物生产的主要宿主细胞之一。


2. CHO细胞说明书与参数

  • 细胞名称:CHO细胞
  • 组织来源:中国仓鼠卵巢组织
  • 细胞特性:贴壁生长,呈上皮样细胞形态,能够进行有效代谢和合成复杂的人类蛋白质
  • 培养条件:常使用DMEM/F12或FreeStyle CHO培养基,添加适量FBS和其他必需营养成分,维持在37°C、5% CO2的恒温恒湿环境下培养

3. CHO细胞市场价格

CHO细胞的价格因供应商、细胞品质(如STR鉴定、无菌性、细胞活力等)、细胞量以及是否包含配套服务(如细胞认证、技术支持等)而异,中国市场上的CHO细胞单价大致在人民币1000元至5000元之间,具体价格请向供应商咨询以获取最新报价。


4. 如何选择公司购买CHO细胞

  • 公司资质:挑选具有合法经营许可证、良好信誉和专业技术团队的生物制品公司或细胞库。
  • 细胞质量保证:确保所购买的CHO细胞通过STR鉴定,无菌检测合格,并提供详细的细胞代数、活力以及来源信息。
  • 技术服务:选择能提供完整细胞培养指南、专业技术支持及售后服务的供应商。

5. CHO细胞类型说明

CHO细胞有许多亚型和改造版本,例如CHO-K1是最原始且广泛使用的细胞系,而CHO-S、CHO-DG44和CHO-DUKXB11则是在CHO-K1基础上优化选育出来的高表达细胞株。


6. CHO细胞来源、特性与类型

  • 来源:CHO细胞最初来源于中国仓鼠卵巢组织的肿瘤细胞。
  • 细胞特性:CHO细胞具有生长速度快、适应性强、对各种生长因子需求较低的特点,且具有高的翻译后修饰能力,适合大规模生产具有正确折叠和功能活性的重组蛋白。
  • 细胞类型:CHO细胞分为不同的亚系,各自具有不同的生长特性和表达效能。

7. CHO细胞培养所需仪器设备

  • 培养箱:37°C、5% CO2的恒温恒湿二氧化碳培养箱
  • 离心机:用于细胞收集、洗涤和浓缩
  • 倒置显微镜:观察细胞形态、生长状态和细胞接种
  • 细胞培养瓶、皿、管:进行细胞培养和传代
  • 生物安全柜:进行无菌操作
  • 液氮罐和冻存管:用于细胞的长期储存和复苏
  • 水浴锅或加热板:用于细胞冻存液的解冻

8. CHO细胞储存及复苏方法

  • 储存:将CHO细胞与冻存保护液混合后,置于液氮罐中长期储存。
  • 复苏流程
    1. 解冻:将冻存管迅速放入37°C水浴中,待细胞完全融化。
    2. 转移细胞:将细胞悬液转移到预冷的离心管中。
    3. 离心与清洗:温和离心后弃去冻存液,用预热的完全培养基清洗细胞。
    4. 重悬与接种:将细胞用新鲜的完全培养基重悬后,均匀接种到预处理好的培养容器中。

9. CHO细胞培养步骤(详细版)

  • 培养基配置:根据供应商推荐,使用合适的CHO细胞专用培养基,加入必要的血清和添加剂。
  • 细胞接种:将复苏或传代后的细胞悬液均匀涂抹在培养瓶内壁。
  • 细胞培养:将接种好的细胞放入37°C、5% CO2的培养箱中,每日观察细胞生长状态。
  • 换液与传代:根据细胞生长情况进行适时换液,当细胞密度达到一定程度时,使用胰酶或EDTA-胰酶混合液消化细胞,并进行细胞传代。

10. CHO细胞培养注意事项

  • 无菌操作:所有细胞操作必须在超净工作台内进行,避免污染。
  • 环境控制:保持恒定的温度、湿度和CO2浓度。
  • 细胞状态监测:定期通过显微镜观察细胞形态、生长速度及有无污染迹象。

11. CHO细胞培养常见问题与解决方案

  • 生长缓慢或停滞:检查培养基的新鲜度、血清批次,必要时更换新鲜培养基或调整细胞接种密度。
  • 细胞形态异常:确认培养条件稳定,排除物理、化学因素及微生物污染。

12. 鉴定CHO细胞品质

  • 形态学鉴定:通过显微镜观察细胞形态是否符合CHO细胞的标准特征。
  • 细胞活力检测:采用台盼蓝排斥法或其它细胞活力检测方法评估细胞活力。
  • STR分析:进行DNA指纹分析,验证细胞株的身份和纯度。

13. CHO细胞应用领域

  • 生物医药产业:CHO细胞是生产治疗性重组蛋白药物(如抗体药物)的主要宿主细胞。
  • 分子生物学与遗传学研究:作为体外模型,用于基因功能、信号转导及蛋白质表达调控等研究。
  • 药物筛选与药效评价:用于药物作用机制研究、药物毒性筛查及药物效果评估。

全文总结

CHO细胞作为一种广泛应用的生物工程技术平台,对于生物医药产品的研发与生产至关重要。在选购和培养CHO细胞的过程中,科研人员应关注细胞来源的合法性、品质保证及供应商的专业技术服务。掌握细胞复苏、培养、传代等关键技术,及时解决常见问题,并通过科学方法鉴定细胞品质,能够确保实验结果的准确性和实验的成功实施。CHO细胞在生物医药领域尤其是在重组蛋白药物生产方面具有重大贡献,同时也为分子生物学和药物研究提供了有力的支持。

weinxin
cwcw202010
熊熊养细胞微信咨询
微信扫一扫
熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:25:21
  • 转载请务必保留本文链接:https://www.yangxibao.com/shop/choxibao_cangshuluanchaoxi.html
匿名

发表评论

匿名网友
:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen:
确定

拖动滑块以完成验证