BT-474细胞:人乳腺导管癌细胞详细介绍及细胞培养注意事项

BT-474细胞:人乳腺导管癌细胞详细介绍及细胞培养注意事项
请注意,以下信息仅供参考,并可能随科学进展和市场变化而更新。在进行任何实验或购买决策之前,请务必咨询专业人士或供应商以获取最新和最准确的信息。

BT-474细胞概述

BT-474细胞是一种源自人乳腺导管癌的细胞株,由E·Lasfargues和W·G·Coutinho于1978年从一名乳腺浸润性导管癌患者体内分离得到。这种细胞因其保留了原发肿瘤的部分特性,如ER阳性和HER2过度表达,而在乳腺癌研究中占有重要地位,特别适用于药物筛选、信号传导机制研究以及癌症疗法的开发与优化。


BT-474细胞详细介绍与参数分类

细胞起源与特性概览

BT-474细胞系源于人乳腺浸润性导管癌组织,由E·Lasfargues和W·G·Coutinho于1978年成功建立,具有典型的上皮细胞形态和贴壁生长特性。该细胞株独特的生物学特性,如ER阳性和HER2/neu过表达,使得它在乳腺癌特别是HER2阳性乳腺癌的研究领域中扮演核心角色。

生长条件与特性参数

  • 培养基选择:BT-474细胞在含10%胎牛血清的DMEM培养基中能够良好生长。
  • 培养环境:理想的培养条件为37°C、5% CO2、饱和湿度的恒温恒湿环境。
  • 细胞形态与生长特性:细胞具有典型上皮细胞外观,生长速度快,适合进行连续传代。

BT-474细胞价格范围

BT-474细胞产品一般以一定的细胞密度(例如1×10^6 cells/T25培养瓶)为单位进行销售。然而,考虑到市场动态、供应商信誉、细胞品质、额外服务(如STR鉴定服务、无菌检测报告等)的差异,BT-474细胞的价格区间并不固定,通常浮动在数百至数千元人民币之间。具体价格需直接咨询各生物制品供应商获取当前报价,以便做出最合适的选择。

价格提示:本文提供的价格信息仅为参考范围,实际购买价格受多种因素影响,请务必直接向供应商获取实时准确报价。


如何选择购买BT-474细胞的渠道

选择购买BT-474细胞时,应着重考虑以下几点:

  1. 供应商资质:选择具有合法生物制品供应资质的公司或研究机构。
  2. 细胞品质保证:要求供应商提供详细的细胞鉴定报告、无菌检测结果和细胞株历史记录。
  3. 技术服务支持:选择提供全程细胞培养技术和售后服务的供应商。
  4. 法规合规性:确保细胞的获取、运输和使用符合所在国家和地区相关生物安全和伦理法规。

BT-474细胞来源、储存及复苏方法

细胞来源:BT-474细胞源于人乳腺癌实体瘤组织样本。

细胞储存:长期储存时,将细胞在含有冷冻保护剂的冻存液中冷冻,并存放在液氮罐中。

细胞复苏

  1. 从液氮罐中取出冻存管,迅速放入37°C水浴中融化。
  2. 解冻后将细胞悬液转移至无菌离心管中,加入适量预热的完全培养基稀释。
  3. 低速离心后弃去上清,用新鲜完全培养基重悬细胞。
  4. 将细胞接种到预涂有适宜生长因子的培养瓶或培养皿中,放回培养箱中培养。

BT-474细胞培养所需仪器设备

  • 二氧化碳培养箱:提供37°C、5% CO2恒温和恒湿环境。
  • 倒置显微镜:用于观察细胞形态和生长状态。
  • 离心机:用于细胞收集、清洗和重悬。
  • 液氮罐:用于细胞的长期冷冻储存。
  • 超净工作台:确保细胞操作过程无菌。
  • 培养瓶、培养皿、离心管等:基本细胞培养耗材。

BT-474细胞培养步骤详解

  1. 细胞复苏与接种:按照上述复苏步骤操作,将复苏的细胞接种至预处理好的培养器皿中。
  2. 细胞培养:将接种好的细胞放入37°C、5% CO2的培养箱中培养。
  3. 培养基更换:细胞贴壁后24-48小时内更换第一次新鲜培养基,之后根据细胞生长情况定期更换。
  4. 细胞传代:当细胞汇合度达80%-90%时,使用胰酶或 EDTA 进行消化,离心后重新接种到新的培养容器中。

BT-474细胞培养注意事项

  • 无菌操作:全程在超净工作台上操作,严格遵守无菌操作规程。
  • 环境控制:确保培养箱的温度、湿度和CO2浓度稳定。
  • 细胞状态监测:定期通过显微镜观察细胞形态和生长速度,避免过度汇合或凋亡。
  • 培养基质量:定期更换新鲜培养基,避免代谢产物累积。

BT-474细胞培养常见问题及解决方法

问题1:细胞生长缓慢或停止

  • 原因:培养基失效、血清质量不佳或细胞老化。
  • 解决方法:更换新鲜培养基,使用高品质血清,必要时重新购买细胞。

问题2:细胞形态异常

  • 原因:细胞污染、培养条件不合适或细胞受损。
  • 解决方法:加强无菌操作,调整培养条件,必要时进行细胞毒性检测。

如何鉴别BT-474细胞品质

  • 形态学鉴定:通过显微镜观察细胞形态和排列是否正常。
  • 生长曲线分析:通过连续测量细胞增殖速率评估细胞活力和生长稳定性。
  • 遗传稳定性验证:利用STR分型技术确保细胞株身份和遗传稳定性不变。

BT-474细胞应用领域

BT-474细胞广泛应用于:

  • 乳腺癌研究:研究乳腺癌发生发展机制,特别是HER2阳性乳腺癌的信号传导通路。
  • 药物筛选与药效评估:用于筛选和测试针对HER2靶点的抗癌药物。
  • 个性化医疗研究:在理解患者个体差异和响应差异方面提供体外模型。

全文总结

BT-474细胞作为人乳腺导管癌细胞模型,因其特性和稳定性在乳腺癌研究领域中具有重要价值。购买时需关注供应商资质、细胞质量、法规合规性等问题,并遵循严格的细胞复苏、培养和传代步骤。在培养过程中需重视无菌操作、环境控制和细胞状态监测,遇到问题时要及时采取针对性解决措施。通过对细胞品质的精确鉴别和充分利用,BT-474细胞在乳腺癌的病因机制探索、药物筛选、以及个性化治疗策略的发展中都发挥了不可或缺的作用。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:30:35
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