BHK-21细胞_仓鼠肾成纤维细胞

BHK-21细胞_仓鼠肾成纤维细胞

BHK-21(仓鼠肾成纤维细胞)(种属鉴定正确)
  细胞名称
BHK-21(仓鼠肾成纤维细胞)(种属鉴定正确)

细胞别称
BHK 21; BHK21; Baby Hamster Kidney-21; Baby Hamster Kidney 21; Baby Hamster Kidney from litter No. 21; BHK

细胞货号
SNL-008

来源
肾;成纤维细胞;自发永生;雄性;1日龄

细胞形态
成纤维细胞样

细胞类型
正常细胞

生长特性
贴壁细胞

收录
ATCC

生物安全等级
1

致瘤性

培养条件
DMEM+10% FBS+1% P/S

培养环境
空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5%

细胞简介
BHK-21 [C-13]的亲本细胞株是由I·A·Macpherson和M·G·P·Stoker于1961年3月从1日龄的仓鼠建立的。随后84天连续培养,期间仅因进行冻存中断了8天,通过单细胞分离建立了13号克隆,即BHK-21 [C-13]。BHK-21 [C-13]细胞可用作转染宿主,用于表达包含选择及扩增标记的DNA的载体。

换液周期
2-3天

培养基体积
T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml

传代比例
1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)

传代方法
1.尽量吸干净T25瓶原培养基;

  2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;

  3.T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;

  4.将培养瓶放入37度培养箱消化;

  5.消化到细胞间隙变大,但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化;

  6.混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;

  7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;

  8.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;

注意事项
不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间

  消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。

冻存液配方
92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);

冻存规格
200-300万/ml,1ml每管

冻存方法
1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;

  2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;

  3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存

注意事项
冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日14:47:56
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