bEnd.3细胞:小鼠脑微血管内皮细胞详细介绍及细胞培养注意事项

bEnd.3细胞:小鼠脑微血管内皮细胞详细介绍及细胞培养注意事项
bEnd.3细胞的价格受市场供需、供应商、规格(如细胞数量、是否含鉴定报告等)等因素影响,大致在人民币1000元至2000元之间。实际价格建议直接咨询多个合规生物制品供应商以获取最新报价。

中英文名称

中文名称:bEnd.3小鼠脑微血管内皮细胞株

英文名称:bEnd.3 Mouse Brain Microvascular Endothelial Cell Line


细胞概述

bEnd.3细胞是一种源自小鼠脑微血管内皮细胞的细胞系,常用于神经科学、血管生物学、药物筛选、疾病模型构建以及药物转运研究等领域。该细胞株保留了内皮细胞的典型特征,如扁平状、细胞间紧密连接、表达内皮特异性标志物、参与血脑屏障形成等。作为实验模型,bEnd.3细胞有助于深入理解脑血管功能、内皮细胞生理与病理反应、药物穿越血脑屏障的机制以及神经退行性疾病的相关研究。


细胞参数分类

  1. 细胞形态:扁平状,贴壁生长,形成紧密连接的单层细胞。
  2. 生长特性:贴壁生长,细胞在培养基中附着于培养容器底部,形成单层细胞屏障。
  3. 组织来源:小鼠脑微血管,源自小鼠脑组织。
  4. 遗传背景:具有脑微血管内皮细胞的遗传特征,如表达CD31、VE-cadherin等内皮标志物。
  5. 药物敏感性:对某些影响血管功能或血脑屏障通透性的药物可能表现出特定反应。
  6. STR鉴定:完成STR分析,确保细胞株的遗传稳定性。

bEnd.3细胞价格范围

bEnd.3细胞的价格受市场供需、供应商、规格(如细胞数量、是否含鉴定报告等)等因素影响,大致在人民币1000元至2000元之间。实际价格建议直接咨询多个合规生物制品供应商以获取最新报价。


选择bEnd.3细胞购买渠道

资质认证:首选具备ISO、GMP、ATCC等国际或国内认可资质的供应商,确保细胞来源合规、质量有保证。

口碑评价:查阅同行评价、学术论文引用及生物试剂电商平台用户反馈,评估供应商的专业水平和服务质量。

技术支持:选择能提供详尽细胞培养手册、售后技术支持及细胞鉴定报告的商家。

订购流程:确保购买流程清晰,包括询价、下单、支付、发货、售后等环节均有明确指引和保障。


bEnd.3细胞来源

bEnd.3细胞源于小鼠脑微血管内皮细胞,经过实验室分离、扩增和传代,形成了稳定的细胞株。此类细胞通常由国际知名的细胞库(如ATCC、DSMZ等)或经授权的生物技术公司提供。


bEnd.3细胞储存及复苏方法

储存:bEnd.3细胞可短期常温保存或长期液氮冻存。冻存时,将细胞与冻存液混合后装入冻存管,储存在液氮罐(-196℃)中。

复苏

  • 解冻:将冻存管迅速放入37℃水浴中,轻轻摇动直至冻存液完全融化。
  • 洗涤:弃去冻存液,用适量预热的完全培养基重悬细胞。
  • 接种:将细胞悬液均匀滴加到已添加合适培养基的培养容器中,置于37℃、5%CO₂培养箱中培养。

bEnd.3细胞培养所需仪器设备及功能使用说明

  1. 细胞培养箱:维持恒定的温度(37℃)、湿度和CO₂浓度(5%),为bEnd.3细胞提供稳定的生长环境。
  2. 倒置显微镜:观察bEnd.3细胞形态、密度和生长状态,进行日常监测和拍照记录。
  3. 离心机:用于细胞传代时的收集与重悬,确保细胞均匀分散。
  4. 超净工作台:提供无菌操作条件,防止细胞培养过程中受到微生物污染。
  5. 移液器:精确吸取和分配培养基、细胞悬液及其他试剂。
  6. 培养皿/瓶/板:承载bEnd.3细胞生长的容器,根据实验需求选用不同规格。
  7. 水浴锅:用于细胞冻存液的快速升温解冻。

bEnd.3细胞培养步骤

  1. 配制培养基:按照要求配制完全培养基(如DMEM/F12+10%FBS+1%双抗+特定内皮细胞生长补充剂)。
  2. 消毒工作区:使用酒精或消毒剂擦拭超净台表面。
  3. 启动培养箱:设定温度为37℃,CO₂浓度为5%,预热。
  4. 接种细胞:将复苏或传代后的bEnd.3细胞均匀接种至预置培养基的培养容器中。
  5. 定期观察:每日或按需使用倒置显微镜检查bEnd.3细胞状态。
  6. 更换培养基:根据细胞生长速率,定期更换新鲜培养基,清除代谢废物。
  7. 细胞传代:当bEnd.3细胞密度达到适宜范围时,使用胰酶或EDTA等消化液处理,随后稀释并重新接种。

bEnd.3细胞培养注意事项

  • 无菌操作:严格执行无菌操作规程,避免微生物污染。
  • 环境控制:保持恒定的培养条件,防止温度、湿度和气体环境波动。
  • 细胞计数:定期进行bEnd.3细胞计数,准确调整细胞密度并判断传代时机。
  • 定期检测:定期进行支原体检测,确保无潜在污染。
  • 试剂质量:使用合格、无菌、未过期的培养基和试剂,尤其是含有内皮细胞生长补充剂的专用培养基。
  • 药物敏感性:在相关实验中,注意细胞对特定药物或化合物的反应性,尤其是影响血管功能或血脑屏障通透性的物质。

bEnd.3细胞培养常见问题及解决方法

问题:bEnd.3细胞生长缓慢或停滞。 解决:检查培养基成分、pH值、CO₂浓度是否适宜,尤其是内皮细胞生长补充剂是否有效。考虑更换供应商或批次。排查是否存在污染。

问题:bEnd.3细胞形态异常或生长过快。 解决:观察细胞是否存在扁平化不明显、细胞间连接松散等现象,或生长速度远超正常范围,可能是污染、营养不良或过度传代所致,需调整培养条件或进行细胞复苏。


如何鉴别bEnd.3细胞品质

  1. 形态观察:bEnd.3细胞应保持典型的扁平状内皮细胞形态,形成紧密连接的单层细胞层,无明显病理变化或异形细胞。
  2. 生长曲线:正常bEnd.3细胞应显示出稳定的增殖趋势,与文献报道或供应商提供的信息相符。
  3. 免疫荧光验证:通过荧光标记抗体检测细胞表面内皮标志物(如CD31、VE-cadherin)的表达,确认其内皮细胞特性。
  4. 功能验证:评估细胞的内皮屏障功能(如跨内皮电阻测定、通透性实验)、药物转运能力等,以确认其与脑微血管内皮细胞的特征相符。
  5. 遗传验证:通过STR分析,确认细胞株的遗传稳定性。
  6. 支原体检测:确保细胞无支原体污染。

bEnd.3细胞应用领域

bEnd.3细胞广泛应用于:

  • 神经科学与血管生物学研究:探究脑血管内皮细胞功能、血脑屏障结构与通透性、神经退行性疾病与血管病变的关系。
  • 药物筛选与药理学研究:测试药物对内皮细胞功能、血脑屏障穿透性的影响,评估药物在神经系统中的分布与效应。
  • 疾病模型构建:模拟神经血管疾病、炎症反应、药物转运障碍等病理状态。
  • 药物递送系统研发:评估纳米载体、脂质体等药物传递系统的跨内皮转运效率。
  • 基因功能研究:通过基因编辑、过表达或敲减等技术,研究与脑血管内皮细胞功能相关的基因。

全文总结:

bEnd.3小鼠脑微血管内皮细胞株作为神经科学、血管生物学及药物研究的重要模型,对于揭示脑血管功能、血脑屏障机制、药物传输及神经退行性疾病等研究具有重要作用。选购时应关注供应商资质、市场口碑、技术支持及细胞来源,确保细胞储存复苏方法正确、培养过程规范。通过形态观察、生长曲线分析、免疫荧光验证、功能验证、遗传验证及支原体检测等手段,确保细胞品质。该细胞株在神经科学、药物筛选、疾病模型构建、药物递送系统研发、基因功能研究等领域具有广泛应用价值。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日14:04:44
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