BEAS-2B细胞:人正常肺支气管上皮细胞详细介绍及细胞培养注意事项

BEAS-2B细胞:人正常肺支气管上皮细胞详细介绍及细胞培养注意事项
BEAS-2B细胞是一种常用的人体正常肺支气管上皮细胞模型,在科学研究中扮演着至关重要的角色。购买时务必选择信誉良好的渠道,关注细胞质量和相关服务保障。细胞复苏、培养和传代过程要求严谨无菌操作,遇到培养问题时应及时查找原因并采取对策。通过形态学、生长曲线和遗传标记等手段验证细胞品质。BEAS-2B细胞广泛应用在呼吸道疾病研究、毒性检测及药物筛选等领域。

BEAS-2B细胞概述

BEAS-2B细胞是一种源自人体正常肺支气管上皮的人源细胞系,广泛应用于呼吸系统生物学、毒理学、致癌机理、药物筛选以及细胞信号传导等领域研究。该细胞系最初由转化人支气管上皮细胞得到,并能在体外模拟正常上皮细胞的功能特性。


BEAS-2B细胞参数及中英文名称

  • 中文名称:BEAS-2B人正常肺支气管上皮细胞
  • 英文名称:BEAS-2B Human Normal Bronchial Epithelial Cells
  • 细胞参数:细胞形态为上皮细胞样,具有贴壁生长特性;培养基通常为含10% FBS的DMEM(有时也可为DMEM/F12混合物),并在5% CO2、37°C环境下生长。细胞传代比例通常为1:2至1:3,每周传代3次,最佳生长密度为80%-90%。

BEAS-2B细胞价格范围

BEAS-2B细胞的价格因市场波动和供应商不同,一般在2023年至2024年间售价大约在2500元左右人民币,但实际购买价格可能会因为附加服务(如STR鉴定、包装、运输等)及细胞批次的不同有所差异,具体价格建议直接咨询供应商获取最新报价。


如何选择购买BEAS-2B细胞的渠道

  • 信誉认证:首选具有国际或国内权威机构认证的细胞库,如ATCC、ECACC、中国典型培养物保藏中心(CCTCC)等,或者与其合作的授权分销商。
  • 品质保证:要求查看细胞株的完整背景资料、最新的STR鉴定报告、无菌检测证书及详细的细胞培养手册。
  • 售后服务:确保供应商能够提供技术支持,包括细胞复苏、培养过程中的疑问解答以及质量问题处理。

BEAS-2B细胞来源、储存及复苏方法

细胞来源:BEAS-2B细胞来源于一位非癌个体的正常人支气管上皮组织,经特定条件下的体外转化和连续传代培育而成。

细胞储存:长期储存采用液氮冷冻技术,将细胞悬浮于含血清和冷冻保护剂DMSO的冻存液中,置于液氮容器内保存。

细胞复苏步骤

  1. 将冻存管从液氮迅速转入37°C水浴中,快速融化。
  2. 待冻存液完全溶解后,将细胞转移到无菌离心管中。
  3. 用预热的完全培养基缓慢稀释细胞,轻柔涡旋混匀。
  4. 分步离心去除DMSO,用新鲜预热的完全培养基重悬细胞。
  5. 将细胞按适当密度接种到预处理过的培养瓶中,置于37°C、5% CO2培养箱中培养。

BEAS-2B细胞培养所需仪器设备

  • 二氧化碳培养箱:维持恒温(37°C)、恒湿及稳定的CO2浓度(5%)。
  • 倒置显微镜:用于观察细胞形态、生长状况和汇合程度。
  • 离心机:用于细胞的收集、洗涤和重悬操作。
  • 液氮储存系统:存放冷冻细胞。
  • 超净工作台:保证细胞操作在无菌环境下进行。
  • 细胞培养相关耗材:培养瓶、培养皿、离心管、移液器、吸头等。

BEAS-2B细胞培养步骤详解

  1. 细胞复苏与接种:首先复苏冻存细胞,然后将复苏后的细胞种入已消毒并添加了饲养层的培养瓶,初始接种密度可设置为每平方厘米约5000个细胞。
  2. 细胞适应期培养:将接种细胞的培养瓶放入37°C、5% CO2培养箱内,细胞需一定时间适应新环境并开始贴壁生长。
  3. 日常维护与培养基更换:在细胞未达到80%-90%汇合度前,每隔1-2天观察细胞状态并适时更换新鲜培养基。
  4. 细胞传代:当细胞达到80%-90%汇合度时,采用胰酶消化法使细胞脱离瓶壁,离心收集细胞,再用新鲜培养基稀释至适当浓度进行传代培养。

BEAS-2B细胞培养注意事项

  • 无菌操作:严格遵守无菌操作规程,所有操作应在超净工作台上完成。
  • 环境控制:确保培养箱温度、湿度及气体环境稳定。
  • 培养基配制:按照规定比例准确配制含血清和其他必需成分的完全培养基。
  • 细胞状态监测:定期检查细胞生长速度、形态变化以及是否有污染迹象。

BEAS-2B细胞培养常见问题及解决方法

问题1:细胞生长停滞或活力下降

  • 可能原因:培养基过期、血清质量不佳、细胞老化或受到物理/化学因素影响。
  • 解决办法:更换新鲜高质量的培养基和血清,核查细胞传代次数,排除培养环境中的不利因素。

问题2:细胞形态改变或贴壁不良

  • 可能原因:细胞消化过度、培养条件不适或细胞本身存在问题。
  • 解决办法:优化消化步骤,调整培养条件,考虑重新购买经过严格质控的细胞株。

如何鉴别BEAS-2B细胞品质

  • 形态学鉴定:通过显微镜观察细胞形态是否符合BEAS-2B细胞的典型特征。
  • 生长性能测试:测定细胞生长曲线,评估细胞增殖能力和世代稳定性。
  • 遗传鉴定:通过STR分型技术来验证细胞株的真实身份,确保购得的是正品BEAS-2B细胞。

BEAS-2B细胞应用领域

  • 呼吸道疾病研究:用于研究呼吸道感染、炎症反应、哮喘、慢性阻塞性肺病等相关疾病的发病机制。
  • 毒性评估与药物筛选:作为体外模型评估化学物质、药物和大气污染物对呼吸道上皮细胞的影响。
  • 基因功能研究:通过基因敲除、过表达等技术研究参与肺部生理和病理过程的关键基因。

全文总结

BEAS-2B细胞是一种常用的人体正常肺支气管上皮细胞模型,在科学研究中扮演着至关重要的角色。购买时务必选择信誉良好的渠道,关注细胞质量和相关服务保障。细胞复苏、培养和传代过程要求严谨无菌操作,遇到培养问题时应及时查找原因并采取对策。通过形态学、生长曲线和遗传标记等手段验证细胞品质。BEAS-2B细胞广泛应用在呼吸道疾病研究、毒性检测及药物筛选等领域。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:30:14
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