ARPE-19细胞:人视网膜色素上皮细胞详细介绍及细胞培养注意事项

ARPE-19细胞:人视网膜色素上皮细胞详细介绍及细胞培养注意事项
购买ARPE-19细胞时应关注供应商资质、细胞质量和售后服务。细胞复苏与培养过程中需严格执行无菌操作规程,密切关注细胞生长状态,并能有效地解决常见问题。通过形态学、功能鉴定和遗传学鉴定确保细胞品质。ARPE-19细胞在眼科疾病研究、药物筛选、再生医学等多个领域具有重要意义。

ARPE-19细胞概述

ARPE-19细胞是一种源自人视网膜色素上皮细胞的人类永生化细胞系,主要应用于视网膜相关疾病的研究,包括年龄相关性黄斑变性、视网膜营养供应、光感受器外节的维持与再生研究,以及药物筛选和毒性测试等。


ARPE-19细胞中英文名称

  • 中文名称:人视网膜色素上皮细胞
  • 英文名称:ARPE-19 Human Retinal Pigment Epithelial Cells

ARPE-19细胞参数分类整理介绍

  1. 细胞类型:人视网膜色素上皮细胞系
  2. 组织来源:取自健康成年人视网膜组织
  3. 形态特征:贴壁生长,呈上皮样细胞形态
  4. 生长条件:通常使用DMEM/F12培养基,添加特定添加剂,如N-2补充剂和胎牛血清,并在37°C、5% CO2环境下培养
  5. 细胞特性:ARPE-19细胞表达视网膜色素上皮细胞特异性标志物,可形成典型的细胞间桥粒结构,并具有吸收光感受器外节物质和合成血管内皮生长因子等功能

ARPE-19细胞价格范围

ARPE-19细胞的价格取决于供应商、细胞批次、细胞数量、是否包含STR鉴定报告等因素,市场价格区间一般在几百至几千元人民币。


如何选择购买ARPE-19细胞的渠道

  1. 供应商资质:优先选择具有国际或国内认可资质的细胞库,如ATCC、中国科学院下属细胞库等。
  2. 细胞质量保证:确保购买的细胞株带有详细的细胞背景信息、最新的STR分型数据以及无菌检测报告。
  3. 技术支持与服务:选择提供全方位细胞培养指导和技术支持服务的供应商。

ARPE-19细胞来源、储存及复苏方法

细胞来源:ARPE-19细胞由Amy Aotaki-Keen在1986年从一名19岁健康男性视网膜组织样本中分离并建立。

细胞储存:长期储存时,将细胞冷冻保存在液氮中,使用含有冷冻保护剂的冻存液封装。

细胞复苏流程

  1. 快速取出冻存管,将其浸入37°C水浴中温和解冻。
  2. 待冻存液完全融化后,将细胞转移至无菌离心管中,加入适量预热的完全培养基稀释。
  3. 离心去除冻存液,用新鲜预热的完全培养基重悬细胞。
  4. 将细胞均匀接种至预先包被合适底物的培养皿中,放入37°C、5% CO2的培养箱中培养。

培养ARPE-19细胞所需仪器设备

  • 二氧化碳培养箱:提供稳定的温度、湿度和CO2浓度环境。
  • 倒置显微镜:用于观察细胞形态和生长状态。
  • 离心机:用于细胞收集、洗涤和重悬操作。
  • 液氮储存系统:用于细胞的长期低温储存。
  • 超净工作台:确保细胞操作在无菌条件下进行。
  • 细胞培养耗材:培养皿、培养瓶、离心管、移液器、吸头等。

ARPE-19细胞培养步骤详述

  1. 细胞复苏与接种:按上述复苏流程操作,将复苏后的细胞悬浮液均匀接种至预包被玻连蛋白或其他底物的培养皿中。
  2. 细胞贴壁与生长:将接种细胞的培养皿放入37°C、5% CO2的培养箱中,细胞开始贴壁并逐渐生长。
  3. 培养基更换:复苏后24-48小时内更换第一次培养基,此后根据细胞生长状态定期更换新鲜培养基。
  4. 细胞传代:当细胞生长达到一定程度(如80%-90%汇合度)时,使用胰酶或Trypsin-EDTA进行消化,收集细胞,用新鲜培养基调整适当浓度后传代至新的培养皿中。

培养ARPE-19细胞注意事项

  • 无菌操作:所有与细胞接触的过程必须在超净工作台内进行,严格遵守无菌操作规程。
  • 特殊培养条件:ARPE-19细胞培养需要特定的分化培养条件才能展示出视网膜色素上皮细胞的典型功能特征。
  • 细胞状态监测:定期检查细胞形态、生长速度以及有无污染迹象,及时调整培养条件。

培养常见问题及解决方法

问题1:细胞生长缓慢或活力降低

  • 可能原因:培养基问题、细胞老化或受到污染。
  • 解决办法:更换新鲜培养基,考虑使用年轻代细胞,加强无菌操作,排查并清除污染源。

问题2:细胞分化状态不佳

  • 可能原因:分化条件不适宜或细胞处于非最佳生长阶段。
  • 解决办法:优化分化培养方案,适时调整细胞传代周期,确保细胞在适合的生长阶段进行分化处理。

如何鉴别ARPE-19细胞品质

  • 形态学鉴定:通过显微镜观察细胞形态,确认是否符合ARPE-19细胞的典型特征。
  • 功能鉴定:检查细胞是否能形成紧密连接、表达视网膜色素上皮细胞特异性标志物。
  • 遗传鉴定:利用STR分型技术验证细胞株身份,确保细胞纯度和真实性。

ARPE-19细胞应用领域

  • 眼科疾病研究:主要应用于年龄相关性黄斑变性、视网膜营养障碍等眼疾的发病机制研究。
  • 药物筛选与毒理评估:作为体外模型筛选对视网膜功能有影响的药物,并评估其毒性。
  • 组织工程与再生医学:研究视网膜色素上皮细胞的再生能力及修复功能。

全文总结

购买ARPE-19细胞时应关注供应商资质、细胞质量和售后服务。细胞复苏与培养过程中需严格执行无菌操作规程,密切关注细胞生长状态,并能有效地解决常见问题。通过形态学、功能鉴定和遗传学鉴定确保细胞品质。ARPE-19细胞在眼科疾病研究、药物筛选、再生医学等多个领域具有重要意义。

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:37:53
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