Ana-1细胞_小鼠巨噬细胞

Ana-1细胞_小鼠巨噬细胞

Ana-1(小鼠巨噬细胞)(STR鉴定正确)

细胞名称 Ana-1(小鼠巨噬细胞)(STR鉴定正确) 细胞别称 Ana-1; ANA1 细胞货号 SNL-020 来源 巨噬细胞;J2逆转录病毒转染;C57BL/6 细胞形态 巨噬细胞样 细胞类型 转化细胞系 生长特性 悬浮细胞 收录 KCB 生物安全等级 1 致瘤性 培养条件 1640+10% FBS+1% P/S 培养环境 空气,95% ; 二氧化碳 (CO2),5% 细胞简介 ANA-1细胞是从感染J2重组逆转录病毒用于永生化的C57BL/6(H-2b)小鼠的骨髓细胞中建立的。ANA-1细胞表现出粘附细胞和非粘附细胞的二型生长模式,形态特征是大量空泡和偏心核。ANA-1细胞FcyR(Ly-17)、Mac-1、Ly-5和热稳定抗原(HSA)以及Ly5.1和Ly6B呈阳性。ANA-1细胞还持续表达溶菌酶,表现出非常高的吞噬活性,并且在LPS治疗时具有肿瘤活性,因此属于骨髓单核细胞谱系。 换液周期 2-3天 培养基体积 T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml 传代比例 1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) 传代方法 1.混匀细胞,收集细胞培养基,900rpm离心3-5min,弃上清;
2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
3.补足完全培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养; 注意事项 不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 冻存液配方 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); 冻存规格 200-300万/ml,1ml每管 冻存方法 1.消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3.将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存 注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案

Tips:1.细胞悬浮圆形生长,偶有小聚团,部分细胞附着瓶底; 2.圆形透亮、细胞膜完整的细胞是活细胞,如果无法判断,可以取少量细胞用台盼蓝染色后计数确定细胞活率; 3.悬浮细胞密度维持1E5-5E5/ml之间,密度过低或者过高可能会影响细胞状态;

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熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日14:06:02
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