293T/17细胞:人胚肾细胞详细介绍及细胞培养注意事项

293T/17细胞:人胚肾细胞详细介绍及细胞培养注意事项
293T/17细胞因其高效转染性能和稳定的基因表达特性,成为现代生物学研究中不可或缺的细胞模型。在购买和培养这类细胞时,科研人员应重视细胞来源的合法性、品质保证以及供应商的服务质量。遵循严格的无菌操作程序,掌握正确的细胞复苏、培养、传代技术,并注意解决细胞培养过程中可能出现的问题,通过科学的细胞品质鉴定方法确保实验结果的可靠性。通过293T/17细胞的广泛运用,科研工作者能够在基因功能研究、病毒包装、药物筛选等领域取得重要进展。

1. 293T/17细胞概述

293T/17细胞是人胚胎肾细胞系HEK293T的一个亚株,来源于人肾上皮细胞,经改造后携带SV40大T抗原,具有较快的生长速度和较高的转染效率,广泛应用于分子生物学、病毒学、基因功能研究、蛋白质表达及疫苗生产等领域。


2. 293T/17细胞说明书与参数

  • 细胞名称:293T/17细胞
  • 组织来源:人胚胎肾组织
  • 细胞特性:贴壁生长,呈上皮样细胞形态,高表达SV40大T抗原,具有高效的转染性能
  • 培养条件:通常使用DMEM高糖培养基,添加10%胎牛血清,并在37°C、5% CO2的恒温恒湿环境中培养

3. 细胞市场价格

在中国市场上,293T/17细胞的价格根据供应商、细胞品质(包括STR鉴定、无菌性检测结果、细胞活力等)、细胞数量以及是否包含STR鉴定报告等因素变化,大致价格区间在人民币1000元至3000元之间,具体价格需直接询问供应商获取最新信息。


4. 如何选择公司购买293T/17细胞

  • 公司资质:选择具有合法经营许可、良好信誉和专业技术背景的生物制品公司或细胞库。
  • 细胞质量保证:确保所购细胞有完整的鉴定资料,包括STR分型、无菌检测记录和细胞活力证明。
  • 技术服务:优先选择能提供详细细胞培养指南、技术支持以及售后服务的供应商。

5. 293T/17细胞类型说明

  • 细胞类型:人胚胎肾细胞系,带有SV40大T抗原修饰的亚株
  • 细胞特性细分:293T/17细胞具有高效转染性能,是进行基因功能研究、蛋白表达及病毒包装的理想细胞模型。

6. 293T/17细胞来源、特性与类型

  • 来源:293T/17细胞源自人胚胎肾脏,经过改造整合了SV40大T抗原基因。
  • 细胞特性:体外培养时具有快速增殖、高转染效率和稳定的基因表达能力。
  • 细胞类型:作为一种研究工具细胞,广泛应用于分子和细胞生物学实验,尤其适合用于病毒包装、基因治疗载体的构建和功能研究。

7. 293T/17细胞培养所需仪器设备

  • 培养箱:37°C、5% CO2的恒温恒湿二氧化碳培养箱
  • 离心机:用于细胞收集、洗涤和浓缩
  • 倒置显微镜:观察细胞形态、生长状态及细胞接种
  • 细胞培养瓶、皿、管:进行细胞培养和传代操作
  • 液氮罐和冻存管:用于细胞的长期储存和复苏
  • 水浴锅或加热板:用于细胞冻存液的解冻

8. 293T/17细胞储存及复苏方法

  • 储存:将293T/17细胞与冻存液混合后,放置在液氮罐中长期储存。
  • 复苏流程
    1. 解冻:将冻存管快速放入37°C水浴中,待细胞完全融化。
    2. 转移细胞:将细胞悬液转移到预冷的离心管中。
    3. 离心与清洗:温和离心后弃去冻存液,用预热的完全培养基清洗细胞。
    4. 重悬与接种:用新鲜的完全培养基将细胞重悬后,均匀接种到预处理好的培养容器中。

9. 293T/17细胞培养步骤(详细版)

  • 培养基准备:按照供应商建议,配置含有10%胎牛血清的DMEM高糖培养基。
  • 细胞接种:将复苏或传代后的细胞悬液均匀涂布于培养瓶内壁。
  • 细胞培养:将接种好的细胞放入37°C、5% CO2的培养箱中培养,每天观察细胞生长状态。
  • 换液与传代:每2-3天更换一次新鲜培养基,当细胞融合度达到80%-90%时,使用胰酶或EDTA-胰酶混合液消化细胞,然后进行细胞传代。

10. 293T/17细胞培养注意事项

  • 无菌操作:所有涉及细胞的操作必须在超净工作台上进行,确保无菌环境。
  • 环境控制:确保培养箱内温度、湿度和CO2浓度恒定。
  • 细胞状态监测:定期通过显微镜观察细胞形态、生长速度以及有无污染迹象。

11. 293T/17细胞培养常见问题与解决方案

  • 生长缓慢或停滞:检查培养基的新鲜度、血清批次及细胞接种密度,必要时更换新鲜培养基或调整接种密度。
  • 细胞形态异常:确保培养条件稳定,排除物理、化学因素及微生物污染。

12. 鉴定293T/17细胞品质

  • 形态学鉴定:通过显微镜观察细胞形态是否符合293T/17细胞的标准特征。
  • 细胞活力检测:采用台盼蓝拒染法或其他细胞活力检测方法评估细胞活力。
  • STR分析:通过DNA指纹技术进行STR分型,验证细胞株的身份和纯度。

13. 293T/17细胞应用领域

  • 分子生物学研究:利用293T/17细胞的高效转染性能,开展基因功能和调控机制研究。
  • 病毒学研究:作为载体系统,用于包装多种病毒载体,包括慢病毒、腺病毒等。
  • 药物筛选与药效评价:用作体外模型筛选药物候选物,并评估药物对目标基因或蛋白的影响。

全文总结

293T/17细胞因其高效转染性能和稳定的基因表达特性,成为现代生物学研究中不可或缺的细胞模型。在购买和培养这类细胞时,科研人员应重视细胞来源的合法性、品质保证以及供应商的服务质量。遵循严格的无菌操作程序,掌握正确的细胞复苏、培养、传代技术,并注意解决细胞培养过程中可能出现的问题,通过科学的细胞品质鉴定方法确保实验结果的可靠性。通过293T/17细胞的广泛运用,科研工作者能够在基因功能研究、病毒包装、药物筛选等领域取得重要进展。

weinxin
cwcw202010
熊熊养细胞微信咨询
微信扫一扫
熊熊
  • 本文由 熊熊 发表于 2024年2月23日13:25:34
  • 转载请务必保留本文链接:https://www.yangxibao.com/shop/293t17xibao_renpeishen.html
匿名

发表评论

匿名网友
:?: :razz: :sad: :evil: :!: :smile: :oops: :grin: :eek: :shock: :???: :cool: :lol: :mad: :twisted: :roll: :wink: :idea: :arrow: :neutral: :cry: :mrgreen:
确定

拖动滑块以完成验证